[發明專利]一種檢測水果中5種萘衍生物的方法

有效

• 申請號: 201710386719.7
• 申請日: 2017-05-26
• 公開（公告）號: CN107144655B
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 仲伶俐;雷紹榮;郭靈安;李曦;毛建霏;付成平;李華仙
• 申請（專利權）人: 四川省農業科學院分析測試中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 吳東勤

1.一種檢測水果中5種萘衍生物的方法,其特征在于，包括：

1)標準溶液的配制

1.0mg/mL標準溶液：分別稱取NAD、NAA、2-NOA、NPA和NAME標準品各10.0mg，用甲醇溶解并轉移至10mL容量瓶中，甲醇稀釋至刻度，混勻后貯存于密閉的棕色玻璃瓶中，分別配制成1.0mg/mL的NAD、NAA、2-NOA、NPA和NAME標準溶液；

10mg/L混合標準溶液：分別移取1.0mg/mL的NAD、NAA、2-NOA、NPA和NAME標準溶液各0.1mL混合于10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，混勻后貯存于密閉的棕色玻璃瓶中，配制成10mg/L混合標準溶液；

混合標準工作溶液：將10mg/L混合標準溶液用含0.1％(v/v)甲酸的體積比為3:7乙腈-水溶液逐級稀釋成0.005、0.01、0.02、0.1和1.0mg/L的混合標準工作溶液，供超高效液相色譜測定；

2)樣品提取

稱取10g粉碎好的水果樣品于100mL具塞離心管中，加入20.0mL乙腈，渦旋2min，加入5g氯化鈉，蓋上蓋子，劇烈振搖1min，4000r/min離心5min，使乙腈和水相分層；

3)樣品凈化

移取10.0mL上層乙腈溶液于100mL梨形瓶中，40℃水浴中旋轉濃縮至干，加入2-5mL含1％-2％(v/v)甲酸的體積比為90:10-95:5二氯甲烷-乙腈淋洗液溶解殘渣，移入用淋洗液活化好的NH₂固相萃取小柱中，收集流出液于50mL雞心瓶中，再用淋洗液洗滌梨形瓶2次，每次用2-5mL淋洗液，再移入上述NH₂固相萃取小柱中，合并流出液，在30℃水浴中旋轉濃縮至干，用1.0mL含0.1％(v/v)甲酸的體積比為3:7乙腈-水溶液溶解殘渣，經0.22μm微孔濾膜過濾后，得樣品溶液，供超高效液相色譜測定；

4)超高效液相色譜測定

用超高效液相色譜測定1)所得的混合標準工作溶液和3)所得的樣品溶液，得到兩者的色譜圖，通過樣品色譜圖的保留時間與相應標準樣品的保留時間對照定性,當樣品色譜圖中色譜峰保留時間與標準樣品色譜圖中的NAD、NAA、2-NOA、NPA和NAME這5種化合物的色譜峰保留時間的相對偏差不大于5％，則定性為檢出，

其中，所述超高效液相色譜測定的條件為：

色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18，1.7μm，2.1×100mm；熒光檢測波長：激發波長Ex＝280nm，發射波長Em＝330nm；柱溫：40℃；進樣量：4μL；流速0.2-0.5mL/min；流動相A為0.1％(v/v)甲酸水溶液，流動相B為0.1％(v/v)甲酸乙腈溶液，梯度洗脫，梯度洗脫程序見表1，

表1 流動相梯度程序

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟1)中，所述甲醇的純度為色譜純。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟3)中，所述NH₂固相萃取小柱用淋洗液活化的步驟為:向NH₂固相萃取小柱中加入5-6mL含1％-2％(v/v)甲酸的體積比為90:10-95:5二氯甲烷-乙腈淋洗液，不收集。