[發明專利]一種醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法

有效

• 申請號: 201710385563.0
• 申請日: 2017-05-26
• 公開（公告）號: CN107091893B
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發明（設計）人: 嚴斌俊
• 申請（專利權）人: 浙江中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

本發明公開了一種醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法。該方法采用液相色譜分析技術，借助一測多評方法，能以莪術二酮單一對照品對醒腦靜注射液或其中間體中的9種指標成分同時進行含量測定。該方法檢測靈敏度高，準確性好，能以較低成本對醒腦靜注射液或其中間體的質量進行評價，可解決因待測成分對照品缺乏而無法進行含量測定的問題，有助于更全面地對醒腦靜注射液進行控制質量。

技術領域

本發明屬于中藥成分含量測定領域，具體涉及一種醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法。

背景技術

醒腦靜注射液是由麝香、郁金、梔子、冰片四味中藥制成的注射劑，具有清熱瀉火、涼血解毒、開竅醒腦的功效，臨床上主要用于中風、腦缺血、意識障礙、急性酒精中毒等病癥。醒腦靜注射液的現行質量標準是2003年的國家藥品標準(WS₃-B-3353-98-2003)，該標準僅對注射液中的麝香酮進行鑒別，對冰片進行含量測定，而對于梔子、郁金中的成分并沒有進行質量控制。

多篇文獻報道了對醒腦靜注射液中麝香酮和冰片的含量測定方法。有文獻報道了對醒腦靜注射液中來源于郁金的莪術雙環烯酮、莪術烯醇、莪術二酮、莪術酮、吉馬酮5個倍半萜類成分的含量測定方法。公開號為CN 105548385 A的中國專利文獻公開了一種醒腦靜注射液液相指紋圖譜測定方法，公開號為CN 102091283 A的中國專利文獻公開了一種醒腦靜注射液氣相指紋圖譜測定方法。指紋圖譜測定方法雖然能以半定量的方式對注射液質量進行評價，但不能對注射液中各指標成分的含量進行準確測定。

另一方面，梔子在腦血管疾病中的治療作用已被多篇文獻報道，而對于醒腦靜注射液中源于梔子的成分目前尚缺少含量測定方法，這不利于實現對該產品的全面質量控制。此外，對于醒腦靜注射液中莪術呋喃二烯酮的含量測定方法，目前尚無報道。

由于梔子、郁金中的揮發性成分并不穩定，且莪術酮、莪術雙環烯酮、4-亞甲基-異佛爾酮等成分的對照品非常緊缺且價格昂貴，若采用常規的多個對照品外標定量測定方法，分析成本太高。一測多評法是一種基于待測成分間的相對校正因子，以一個內參物對照品代替多個成分對照品進行定量的方法，可用于解決對照品緊缺和檢測成本高的問題，是一種適合中藥特點的多指標質量評價新模式。因此為了在生產中控制好醒腦靜注射液中間體及其成品的質量，很有必要在現有技術基礎之上研究設計出能準確且低成本地測定源于梔子和郁金的多指標成分含量的方法。

發明內容

本發明的目的是為了解決上述問題，基于一測多評法，提供一種能夠準確測定醒腦靜注射液及其中間體中異佛爾酮、4-亞甲基-異佛爾酮、莪術雙環烯酮、莪術烯醇、莪術二酮、莪術酮、莪術呋喃二烯酮、莪術醇和吉馬酮9種成分含量的高效液相色譜分析方法。該方法檢測靈敏度高，操作簡便、實用性高、檢測成本低，可以客觀、全面、準確地評價醒腦靜注射液及其中間體的質量，解決因對照品缺乏而無法準確測定多種指標成分含量的問題。

為了實現以上目的，本發明采取的技術方案為：

一種醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備

直接將醒腦靜注射液或其中間體作為供試品溶液進行分析；本發明醒腦靜注射液中間體指梔子和郁金的水蒸氣蒸餾提取液；

(2)對照品溶液的制備

分別精密稱取異佛爾酮、4-亞甲基-異佛爾酮、莪術雙環烯酮、莪術烯醇、莪術二酮、莪術酮、莪術呋喃二烯酮、莪術醇、吉馬酮9種成分的對照品適量，分別用質量分數為30～100％的甲醇水溶液溶解并定容，制成具有已知濃度的各指標成分的單一對照品儲備液；

再分別精密吸取各成分的單一對照品儲備液適量，混合后加質量分數為10～50％的甲醇水溶液稀釋得到適宜濃度的混合對照品溶液，備用；

(3)相對校正因子的測定