[發明專利]一種納米凝膠斜面培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 201710380512.9
• 申請日: 2017-05-25
• 公開（公告）號: CN107034140B
• 公開（公告）日: 2019-09-13
• 發明（設計）人: 潘崢嶸
• 申請（專利權）人: 句容億格納米材料廠
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 王云

發明公開了一種納米凝膠斜面培養基及其制備方法，屬于微生物培養領域。在普通的斜面瓊脂培養基的基礎上用部分納米凝膠粒子以及瓊脂糖凝膠替代部分的瓊脂粉，具體以質量分數計算首先用納米凝膠粒子替代20％?30％的瓊脂粉，再用瓊脂糖凝膠替代25％?35％的瓊脂粉；有效延緩了培養基的凝固時間以及凝固速度，提高了斜面培養基制備時厚度均一性程度，也提高了培養基營養物質的均勻分布程度，從而有效保證培養以及后續測試結果的準確性，避免多次重復試驗，縮短試驗時間、減少誤差，有利于提高試驗的精確程度，此外，本發明的制備方法設計合理，操作簡單方便。

技術領域

本發明涉及微生物培養領域，尤其涉及一種納米凝膠斜面培養基及其制備方法。

背景技術

培養基是微生物發酵過程或動植物細胞培養過程中供微生物或動、植物細胞生長、繁殖或累積代謝產物所必需的營養基質。一般培養基的成分包括:碳源、氮源、礦物質，以及其他必需物質，如某些生物自身不能合成的物質，如某些氨基酸、維生素或核苷酸等。此外，培養基中還常加入pH緩沖劑以維持穩定的pH。

現有技術中固體培養基一般都是以瓊脂為主要凝固的載體再輔以其他營養物質，但是應用于斜面培養基時存在一定的問題，由于瓊脂在40℃-45℃時的凝固速度過快，凝固時間過短導致在進行斜面培養基制備時，容易造成凝固不均，斜面上下厚度差異太大的問題，一方面會影響菌液的生長營養均衡度，另一方面會造成涂布時出現涂布不均，太薄的地方劃線時出現劃破劃爛的情況從而影響后期試驗的準確性問題。

發明內容

發明目的：為了克服現有技術中存在的問題，本發明提出了一種有效控制培養基的凝固速度，提高斜面培養基制備時厚度均一性和培養基營養物質均勻分布問題的納米凝膠斜面培養基及其制備方法。

技術方案：為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案為：一種納米凝膠斜面培養基，在普通的斜面瓊脂培養基的基礎上用部分納米凝膠粒子以及瓊脂糖凝膠替代部分的瓊脂粉，具體以質量分數計算首先用納米凝膠粒子替代20％-30％的瓊脂粉，再用瓊脂糖凝膠替代25％-35％的瓊脂粉；

所述納米凝膠粒子為氧化鋅-二氧化鈦納米復合材料的制備：將氯化鋅溶于十倍體積的無水乙醇的酸性溶液中，低溫等離子反應器中反應10-20min后加入二氧化鈦粉末繼續反應20-30min，反應溫度為-12～-6℃，反應完畢后取出充分超聲攪拌至液相分散均勻；調節pH為2-3，后再置于低溫等離子體反應器內-5-0℃靜置12h以上，形成均一溶膠，再取出蒸發干燥轉變為凝膠，得納米凝膠粒子。

更為優選的，所述瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖與TAE溶液以2:3的質量比配制而成。

更為優選的，所述納米凝膠粒子在除培養基溶劑蒸餾水外的質量百分比含量不高于50％。

更為優選的，所述納米凝膠粒子的尺寸小于0.1μm。

本發明還公開了上述一種納米凝膠斜面培養基的制備方法，包括如下步驟：

A)培養基基液的配制：按所需用途的斜面瓊脂培養基配方，稱取除瓊脂粉外的其他原料，溶解攪拌均勻成培養基基液，調節到所需pH；

B)培養基的配制：向已經調節好pH的培養基基液中加入計算好的所需量的瓊脂粉、瓊脂糖凝膠后加熱攪拌至完全溶解再加入納米凝膠粒子，繼續加熱攪拌至完全溶解，按斜面瓊脂培養基的制備方法分裝、傾斜凝固得到目的培養基；

C)后處理：滅菌處理后保溫待用，得到所需納米凝膠斜面培養基。

所述滅菌處理具體方式為化學滅菌活處理方式進行，高壓消毒的方式會對瓊脂糖凝膠產生破壞。