[發(fā)明專利]一種HE染色及調(diào)整方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710376288.6
• 申請日: 2017-05-25
• 公開（公告）號: CN107389416A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周紅敏;彭興旺;易達;商亞彤;張亮
• 申請（專利權(quán)）人: 長沙金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于切片染色方法領(lǐng)域，具體是指一種HE染色及調(diào)整方法。

背景技術(shù)

蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining)，簡稱HE染色法， 石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi) 的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細 胞外基質(zhì)中的成分著紅色。

現(xiàn)有技術(shù)中雖然存在HE染色方法，但效果并不佳，實際實施的效果也 不盡如人意，尤其是在操作出現(xiàn)問題，標(biāo)本效果不達標(biāo)時，缺少配套的調(diào)整 方法。

因此，如何研發(fā)一種HE染色及調(diào)整方法，能夠解決上述問題，便成為 亟待解決的技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

本申請解決的主要問題是提供一種HE染色及調(diào)整方法，不僅具有常規(guī) 染色方法操作簡單等優(yōu)點，還能完善操作方法，對不同染色問題進行調(diào)整的 HE染色及調(diào)整方法，以解決一種HE染色及調(diào)整方法成本高、維護和運行費 用高、操作難度高、難以復(fù)制操作的技術(shù)問題。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明公開了一種HE染色及調(diào)整方法，其技 術(shù)方案如下：

一種HE染色及調(diào)整方法，其特征在于，包括：

步驟一：將切好的石蠟切片在60-70℃的烤箱中烘烤至少10分鐘；

步驟二：將步驟一中得到的切片進行脫蠟；

步驟三：將步驟二中得到的切片使用蘇木素染液染色5-8分鐘后用水清 洗1分鐘，然后使用0.5-1％鹽酸酒精分化片刻，在切片顏色由藍變紅后，使 用飽和碳酸鋰反藍片刻，所述切片顏色由藍變紅，之后使用1％伊紅酒精浸 染50-100秒；

步驟四：將步驟三中得到的切片經(jīng)過脫水操作，然后使用二甲苯I進行 透明，時間為50-100秒；

步驟五：將步驟四中得到的切片取出后用中性樹膠封固。

優(yōu)選的，所述步驟一中的脫蠟包括：

步驟1：使用二甲苯I AR浸泡5-7分鐘；

步驟2：使用二甲苯IIAR浸泡5-7分鐘；

步驟3：使用100％酒精I浸泡50-100秒；

步驟4：使用100％酒精II浸泡50-100秒；

步驟5：使用95％酒精浸泡50-100秒；

步驟6：使用80％酒精浸泡50-100秒；

步驟7：用水清洗。

優(yōu)選的，所述步驟四還包括使用二甲苯II再次透明，時間為50-100秒。

優(yōu)選的，所述步驟三中，使用1％伊紅酒精浸染之前使用溫水或者95％ 酒精浸泡10-80秒。

優(yōu)選的，所述步驟四中的脫水操作包括：

步驟a：使用95％酒精浸泡50-100秒；

步驟b：使用95％酒精浸泡50-100秒；

步驟c：使用100％酒精I浸泡50-100秒；

步驟d：使用100％酒精II浸泡50-100秒。

優(yōu)選的，所述步驟五中使用的中性樹膠，預(yù)先用二甲苯溶解。

優(yōu)選的，還包括觀察染色結(jié)果及染色問題，根據(jù)染色問題進行調(diào)整。

優(yōu)選的，所述染色問題及對應(yīng)的調(diào)整方法包括：

如染色切片發(fā)白，判定為二甲苯脫蠟時間不夠，延長脫蠟時間或者更換 二甲苯；

如染色切片發(fā)灰，判定為組織固定脫水不佳或者染液配置PH不符，應(yīng)改 進組織固定脫水程序或者改進染液配方；

如染色切片著色不均勻，判定為染液太少或者分布不均，應(yīng)增加染液量或 在染液中加入甘油等增強液體親和力；

如染色切片染色偏藍，判定為蘇木素染色時間過久或者分化不足，應(yīng)減少 蘇木素染色時間或者延長分化時間；

如染色切片染色偏紅，判定為伊紅染色時間過久或者染色不足，應(yīng)改進蘇 木素染色時間或者減少伊紅染色時間；

如核著色欠佳，判定為組織脫水不佳，應(yīng)加強組織固定脫水，將切片用生 物穿透劑進行處理以利于蘇木素著色。

本申請?zhí)峁┑腍E染色及調(diào)整方法操作簡單便利并且靈活、不僅具有常規(guī) 染色方法操作簡單等優(yōu)點，還能根據(jù)不同的實際情況完善操作方法，對不同染 色問題進行調(diào)整，染色效果好。

具體實施方式