[發明專利]一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法

有效

• 申請號: 201710375782.0
• 申請日: 2017-05-25
• 公開（公告）號: CN107114244B
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 劉杰;莊玉芳;吳麗霞;吳潔;孫威;乙引
• 申請（專利權）人: 貴州師范大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 貴陽春秋知識產權代理事務所(普通合伙) 52109
• 代理人: 楊云

本發明公開了一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法，包括以下步驟：1）外植體的采集及預處理：將從野外采集回來的巴蜀報春幼苗進行修整，把不需要的部分去掉，取生長狀況良好的葉片、葉柄、莖尖以及根做為外植體，自來水沖洗30min，用干凈的濾紙將水分吸干；2）外植體的消毒：用10%NaClO消毒10min，期間攪拌，無菌水沖洗3?4遍，將無菌水倒干凈，備用；3）接種：用經過高溫高壓滅菌的鑷子夾取將滅菌完的外植體接種到MS+0.6mg/L KT+0.1mg/L 2,4?D+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉培養基上，培養于14h/d光照，溫度22℃培養室中。本發明通過組織培養的方法對其進行繁殖，解決了巴蜀報春依靠其種子自然萌發來繁殖后代的方式效率很低的問題。

技術領域

本發明屬于植物脫毒與組織培養快繁技術領域，具體地涉及一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法。

背景技術

巴蜀報春（Primula rupestris Pax et K. Hoffm）,是報春花科報春花屬多年生草本植物。是一種重要的觀賞花卉，其繁殖方式主要依靠種子繁殖，也可以用分株法進行繁殖。但其種子的壽命很短，發芽力喪失快，例如春天采收的種子在秋天播種，發芽率會下降一半，陳種子的發芽率更低，有的甚至不發芽。并且其種子很小，又是喜光發芽的種子，因此依靠其種子自然萌發來繁殖后代的方式效率很低。

近年來，雖然有文獻對報春花的組織培養技術進行了研究，但目前為止，對巴蜀報春的相關研究還尚未報道，包括巴蜀報春的組織培養快繁技術。巴蜀報春目前僅在湖北省宜昌市有發現，其他地區未見有報道，而且對其研究的文獻暫時也沒有。由于其種子繁殖率低，現已被列入瀕危保護物種。故我們希望可以通過組織培養的方式可以實現其快速繁殖的目的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法，以解決巴蜀報春依靠其種子自然萌發來繁殖后代的方式效率很低的問題。

本發明的目的及解決其主要技術問題是采用以下技術方案來實現的：一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法，其操作流程包括以下步驟：

1）外植體的采集及預處理：將從野外采集回來的巴蜀報春幼苗進行修整，把不需要的部分去掉，取生長狀況良好的葉片、葉柄、莖尖以及根做為外植體，自來水沖洗30min，用干凈的濾紙將水分吸干；

2）外植體的消毒：用10%NaClO消毒10min，期間攪拌，無菌水沖洗3-4遍，將無菌水倒干凈，備用；

3）接種：用經過高溫高壓滅菌的鑷子夾取將滅菌完的外植體接種到MS+0.6mg/LKT+0.1mg/L 2,4-D +30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉培養基上，培養于14h/d光照，溫度22℃培養室中。

上述的步驟1）采用野生巴蜀報春的莖尖為最佳外植體。

上述的步驟3）用經過高溫高壓滅菌的鑷子夾取已經過滅菌處理的外植體。

上述的步驟3）培養基PH為5.8。

上述的步驟3）20Day后可以肉眼可見長出無菌苗。

本發明與現有技術相比具有明顯的優點和優異效果。由以上技術方案可知，本發明通過組織培養的方法對其進行繁殖，以解決巴蜀報春依靠其種子自然萌發來繁殖后代的方式效率很低的問題，為對巴蜀報春的研究奠定基礎，可以彌補這一物種在對報春花科的研究中的空缺，具有一定的經濟效益和社會效益。

具體實施方式

以下結合較佳實施例，對依據本發明提出的一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法具體實施方式、特征及其功效，詳細說明如后。

一種誘導巴蜀報春無菌苗快速繁殖的方法，其操作流程包括以下步驟：