[發明專利]黃腐酚在制備蛋白激酶B抑制劑方面的應用

有效

• 申請號: 201710374439.4
• 申請日: 2017-05-24
• 公開（公告）號: CN107115328B
• 公開（公告）日: 2019-08-30
• 發明（設計）人: 董子鋼;李美賢;劉雪嬌;宋孟秋;劉康棟
• 申請（專利權）人: 中美（河南）荷美爾腫瘤研究院
• 主分類號: A61K31/12
• 分類號: A61K31/12;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新;楊海霞

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種黃腐酚在制備蛋白激酶B抑制劑方面的應用，其通過抑制蛋白激酶B激酶活性來預防和抑制腫瘤的生長。

背景技術

黃腐酚（Xanthohumol）是一種異戊二烯黃酮，主要來源于啤酒花及中藥苦參。其具有抗炎、抗糖尿病、抗氧化、抗病毒等多種活性。AKT也被稱為蛋白激酶B（PKB），其涉及多條信號通路，通過影響下游多種因子的活化狀態，發揮著抑制凋亡、促進增殖的關鍵作用。蛋白激酶B激酶本身及其上游調節分子在超過50%的人類腫瘤中均有異常改變。抑制蛋白激酶B對于預防和治療腫瘤具有重要作用。本發明經研究發現：黃腐酚對腫瘤的抑制作用機制與其抑制蛋白激酶B激酶活性相關，這一發現將對具有蛋白激酶B異常表達的腫瘤病人的治療具有重要意義。

發明內容

本發明目的在于提供一種天然化合物黃腐酚在制備蛋白激酶B抑制劑方面的應用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

本發明提供了黃腐酚在制備蛋白激酶B抑制劑方面的應用。即本發明發現了黃腐酚對蛋白激酶B激酶的抑制作用，因而黃腐酚可用作制備蛋白激酶B抑制劑。黃腐酚（Xanthohumol），別名：黃腐醇，分子式：C₂₁H₂₂O₅，分子量：354.4，是一種黃色針狀結晶，可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑。黃腐酚市場上有售，可直接購買普通市售產品。

具體的，本發明經實驗發現：黃腐酚通過抑制蛋白激酶B激酶活性來預防和抑制腫瘤生長，黃腐酚對蛋白激酶B產生抑制作用的濃度范圍為:0.3－2.5 μM。

進一步的，本發明還提供了黃腐酚在制備抗腫瘤藥物方面的應用。如，本發明提供了黃腐酚在制備預防和抑制食管鱗癌藥物方面的應用。黃腐酚在濃度范圍為:2.5－5 μM時能夠抑制食管鱗癌細胞（如：KYSE70，KYSE450，KYSE510等）的增殖。

本發明還提供了黃腐酚在制備抑制食管癌人源化移植瘤模型腫瘤生長藥物中的應用，即其可以抑制食管癌人源化移植瘤模型（PDX）腫瘤的生長。

進一步的，黃腐酚對PDX模型腫瘤的抑制作用與其抑制蛋白激酶B激酶活性有關，黃腐酚在劑量80 mg/kg、160 mg/kg時能抑制食管癌人源化移植瘤模型腫瘤的生長。PDX模型荷瘤小鼠在用黃腐酚治療后，腫瘤樣本p-AKT、 p-GSK3β的表達量顯著性降低。

和現有技術相比，本發明的有益效果：

1）本發明經試驗發現：黃腐酚對腫瘤的抑制作用機制與其抑制蛋白激酶B激酶活性相關，這一發現將對具有蛋白激酶B異常表達的腫瘤病人的治療具有重要意義；

2）以本發明為例，可以將黃腐酚作為蛋白激酶B抑制劑應用于腫瘤的預防及治療中。蛋白激酶B與細胞存活、細胞凋亡密切相關，抑制蛋白激酶B激酶的活性能夠起到預防及治療腫瘤的作用。本發明中黃腐酚能夠抑制蛋白激酶B激酶活性，并能夠抑制食管癌細胞增殖、抑制食管癌人源化移植瘤模型（PDX）腫瘤的生長。因此黃腐酚可應用于多種腫瘤（肺癌、胃癌、結腸癌、肝癌、乳腺癌等），可能也會通過對蛋白激酶B激酶活性的抑制而抑制腫瘤的生長。此外，本發明的黃腐酚還可與其他化療藥或激酶抑制劑一起使用，用于腫瘤的預防及治療。

附圖說明

圖1為黃腐酚對蛋白激酶B的抑制作用，其中，黃腐酚對蛋白激酶B產生抑制作用的濃度范圍為:0.3－2.5 μM；

圖2為黃腐酚在對食管鱗癌細胞的抑制作用，其中，黃腐酚在濃度范圍為:2.5－5 μM時能夠抑制食管鱗癌細胞KYSE70，KYSE450，KYSE510的增殖。本圖將對照組做為100%，其他加藥不同濃度組均與其進行比較計算出細胞活性。*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001；

圖3為黃腐酚對食管癌人源化移植瘤模型（PDX）EG9的預防及抑制作用結果。黃腐酚在劑量為80 mg/kg及160 mg/kg時能顯著抑制腫瘤的生長。*p<0.05, **p<0.01；

圖4為PDX模型EG9腫瘤樣本的免疫組化結果。通過對黃腐酚用于PDX模型EG9腫瘤的預防及治療作用中得到的腫瘤樣本進行免疫組化染色，發現腫瘤樣本p-AKT, p-GSK3β的表達量顯著性降低。*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001；