[發明專利]通過抑制腫瘤抑制基因的天然反義轉錄物治療腫瘤抑制基因相關性疾病

在審

• 申請號: 201710373876.4
• 申請日: 2009-12-03
• 公開（公告）號: CN107338251A
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發明（設計）人: J.科拉德;O.霍爾科瓦謝爾曼
• 申請（專利權）人: 庫爾納公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/712;A61P35/00;C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司72001
• 代理人: 梁謀,黃希貴

1.一種在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括：

使所述細胞或組織與至少一種5-30個核苷酸長度的反義寡核苷酸接觸，其中所述至少一種寡核苷酸與一種多核苷酸的反向互補序列具有至少50％的序列同一性，所述多核苷酸包含以下核苷酸序列內的5-30個核苷酸：SEQ ID NO:4的核苷酸1-1675、或者SEQ ID NO:5的核苷酸1-518、或者SEQ ID NO:6的核苷酸1-759、或者SEQ ID NO:6a的核苷酸1-25892、或者SEQ ID NO:6b的核苷酸1-279、或者SEQ ID NO:7的核苷酸1-1982、或者SEQ ID NO:8的核苷酸1-789、或者SEQ ID NO:9的核苷酸1-467(圖5)；從而在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達。

2.一種在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括：

使所述細胞或組織與至少一種5-30個核苷酸長度的反義寡核苷酸接觸，其中所述至少一種寡核苷酸與腫瘤抑制基因多核苷酸的天然反義序列的反向互補序列具有至少50％的序列同一性，從而在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達。

3.一種在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括：

使所述細胞或組織與5-30個核苷酸長度的反義寡核苷酸接觸，其中所述寡核苷酸與腫瘤抑制基因多核苷酸的反義寡核苷酸具有至少50％的序列同一性，從而在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達。

4.一種在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括：

使所述細胞或組織與靶向腫瘤抑制基因多核苷酸的天然反義序列的一個區域的至少一種反義寡核苷酸接觸，從而在體內或體外調節患者細胞或組織中的腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達。

5.一種在體內或體外調節哺乳動物細胞或組織中的腫瘤抑制基因的功能和/或表達的方法，所述方法包括：

使所述細胞或組織與至少一種5-30個核苷酸長度的短干擾RNA(siRNA)寡核苷酸接觸，所述至少一種siRNA對腫瘤抑制基因多核苷酸的反義多核苷酸是特異性的，其中所述寡核苷酸與腫瘤抑制基因多核苷酸的反義和/或有義核酸分子的至少大約5個連續核酸的互補序列有至少50％的序列同一性；從而在體內或體外調節哺乳動物細胞或組織中的腫瘤抑制基因的功能和/或表達。

6.一種在體內或體外調節哺乳動物細胞或組織中的腫瘤抑制基因的功能和/或表達的方法，所述方法包括：

使所述細胞或組織與對腫瘤抑制基因多核苷酸的有義和/或天然反義鏈的非編碼和/或編碼序列特異性的大約5-30個核苷酸長度的至少一種反義寡核苷酸接觸，其中所述至少一種反義寡核苷酸與SEQ ID NO:1、1a、1b、2、2a、2b、3、3a、4、5、6、6a、6b、7、8和9中的至少一種核酸序列具有至少50％的序列同一性；從而在體內或體外調節哺乳動物細胞或組織中的腫瘤抑制基因的功能和/或表達。

7.一種包含至少一種修飾的合成的修飾寡核苷酸，其中所述至少一種修飾選自：至少一種修飾的糖部分；至少一種修飾的核苷酸間鍵合；至少一種修飾的核苷酸；和它們的組合；和進一步地其中所述寡核苷酸是反義化合物，在體內或體外其雜交至腫瘤抑制基因多核苷酸并且與正常對照相比調節腫瘤抑制基因多核苷酸的功能和/或表達。

8.一種包含對一種或多種腫瘤抑制基因多核苷酸特異性的一種或多種寡核苷酸的組合物，所述多核苷酸包含反義序列、互補序列、等位基因、同系物、同種型、變體、衍生物、突變體、片段或它們的組合。

9.一種預防或治療與至少一種腫瘤抑制基因多核苷酸和/或其至少一種編碼產物相關的疾病的方法，所述方法包括：

給予患者治療有效劑量的至少一種結合所述至少一種腫瘤抑制基因多核苷酸的天然反義序列的反義寡核苷酸，并調節所述至少一種腫瘤抑制基因多核苷酸的表達；從而預防或治療與所述至少一種腫瘤抑制基因多核苷酸和/或其至少一種編碼產物相關的疾病。

10.一種鑒定和選擇用于體內給予的至少一種寡核苷酸的方法，所述方法包括：選擇與疾病狀態有關的目標多核苷酸；鑒定至少一種包含與選定目標多核苷酸互補或反義方向的至少5個連續核苷酸的寡核苷酸；檢測在嚴格雜交條件下反義寡核苷酸和所述目標多核苷酸的雜合體的熱熔點；以及根據獲得的信息選擇用于體內給予的至少一種寡核苷酸。