[發(fā)明專利]磁性聯(lián)合交聯(lián)酶聚集體生物催化劑及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710373785.0
• 申請(qǐng)日: 2017-05-24
• 公開（公告）號(hào): CN107227301B
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫立力;劉篤強(qiáng);李偉;陳倩;李晶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N9/02
• 分類號(hào): C12N9/02;C12N9/04;C12P17/18
• 代理公司: 重慶弘旭專利代理有限責(zé)任公司 50209
• 代理人: 高彬

1.一種磁性聯(lián)合交聯(lián)酶聚集體生物催化劑，包含NADH依賴的3-奎寧酮還原酶QNR、葡萄糖脫氫酶GDH、氨基功能化的磁性納米粒，其特征在于：所述生物催化劑在衍射角度2θ為30.5±0.2°、35.4±0.2°、44.7±0.2°、57.3±0.2°、63.4±0.2°處有衍射峰；所述QNR是Accession No: AB733448，所述GDH是 Accession No: AY930464；所述生物催化劑為球形顆粒，粒徑為1.5±0.5μm；所述氨基功能化的磁性納米粒為氨基功能化的磁性Fe₃O₄納米顆粒，由以下方法制得：將磁性Fe₃O₄納米顆粒用乙醇/水混合溶液分散，在20-80℃，轉(zhuǎn)速400-1000r/min攪拌1.0-3.0小時(shí)，加入濃氨水?dāng)嚢?.5-1.5小時(shí)后，再加入四乙氧基硅烷，轉(zhuǎn)速1000-2000r/min攪拌8-16小時(shí)，最后加入氨丙基三乙氧基硅烷，pH 8-11，轉(zhuǎn)速1000-2000r/min攪拌8-16小時(shí)，然后分離得到氨基功能化的磁性Fe₃O₄納米顆粒。

2.如權(quán)利要求1所述磁性聯(lián)合交聯(lián)酶聚集體生物催化劑，其特征在于：所述生物催化劑在波數(shù)為3316±4, 、2946±4、1659±4、1540±4、1092±4、799±4、583±4、463±4處有紅外特征吸收峰。

3.如權(quán)利要求1或2所述磁性聯(lián)合交聯(lián)酶聚集體生物催化劑，其特征在于：所述生物催化劑的酶負(fù)載量為5-15%。

4.如權(quán)利要求1所述磁性聯(lián)合交聯(lián)酶聚集體生物催化劑，其特征在于，所述磁性Fe₃O₄納米顆粒由以下方法制得：將FeCl₃?6H₂O和 FeCl₂?4H₂O以物質(zhì)的量之比為2:1的比例溶于去離子水中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下以轉(zhuǎn)速500-1500 r/min機(jī)械攪拌0.5-1.0小時(shí)，然后加入濃度為8-12 M的NaOH溶液，轉(zhuǎn)速1000-2000 r/min機(jī)械攪拌1-1.5小時(shí)；升溫至70-100℃，熟化0.5-2.0小時(shí)；降至室溫，磁性分離得到磁性Fe₃O₄納米顆粒。