[發明專利]檢測人體尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法

有效

• 申請號: 201710373546.5
• 申請日: 2017-05-24
• 公開（公告）號: CN107290444B
• 公開（公告）日: 2019-12-06
• 發明（設計）人: 陳靜宜;程雅婷;陳智;劉偉霞;趙蓓蓓;李維;佘旭輝;禤學怡;李卓陽;董衡;沙小花
• 申請（專利權）人: 廣州金域醫學檢驗中心有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 44205 廣州嘉權專利商標事務所有限公司
• 代理人: 許飛<國際申請>=<國際公布>=<進入國

1.一種檢測人體尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法，包括如下步驟：

1)前處理：對尿液進行液相檢測前處理；

2)液相洗脫：將前處理后的尿樣以液相色譜進行分析，所述分析條件為：

固定相：色譜柱為反向鍵合硅膠柱；

流動相：A相為甲醇；B相為15～25 mmol/L的乙酸銨緩沖液，并以乙酸調pH 5.5～7.0；梯度洗脫方式；

3)檢測：以熒光檢測器檢測；

所述前處理步驟之前，還包括預處理步驟，所述預處理步驟為：尿液收集后立即加入5～7M的鹽酸，冷凍避光保存；

所述液相洗脫步驟中：

所述色譜柱為Poroshell 120 EC-C18；

所述梯度洗脫方式為：

時間 (分鐘)	流動相 A%*	流動相 B%*
0.00	0	100
2.5	0	100
4.0	10	90
4.5	90	10
6.5	90	10
7.0	0	100
8.5	0	100

色譜柱的柱溫為28～32℃；

流動相的流速為0.3～0.5 mL/min；

液相洗脫時的進樣量為0.5～2μL；

檢測條件為：激發光波長為358～362nm，發射光波長為448～452nm；

在進行液相洗脫時，間歇性對色譜柱進行沖柱；

進樣盤的溫度為2～6℃。