[發明專利]一種高效扁柏雙黃酮的制備方法

在審

• 申請號: 201710370064.4
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107216301A
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發明（設計）人: 戴勤;王冬梅;李慧珍
• 申請（專利權）人: 蕪湖歐標農業發展有限公司
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙)11427
• 代理人: 黃枝傳

1.一種高效扁柏雙黃酮的制備方法，其特征在于：所述的高效扁柏雙黃酮的制備方法包括以下步驟：

第一步，制備提取基體，截取生長旺盛且無病蟲害的側柏樹葉及當前生半木質化枝條，然后將截取的植物組織進行-10℃—0℃中風干保存，制備得到提取基體；

第二步，提取基體粉碎，完成第一步后，將獲取的提取基體在1—10分鐘內將溫度下降至-20℃—-10℃并保溫，然后將降溫后的提取基體放置到粉碎機進行粉碎，制備得到80—250目粉末狀提取基體，其中在粉碎過程中，提取基體溫度為-10℃—-5℃，然后將粉碎后粉末狀提取基體自然升溫至-5℃—5℃后保溫備用；

第三步，浸漬，將第二步制備得到的粉末狀提取基體添加到體積為粉末狀提取基體體積5—10倍的石油醚中，然后通過攪拌裝置對混合后的混合物進行單向勻速攪拌均勻，其中攪拌速度為50—300轉/分鐘，攪拌時間為1—3小時，并在攪拌前1—10分鐘內將混合物溫度升高至58℃—90℃，并對混合物進行回流作業，并分別對回流后的固體殘渣和回流后收集的混合溶液進行收集；

第四步，過濾，通過負壓過濾裝置對第三步收集到的固體殘渣和回流后收集的混合溶液分別進行固液分離過濾，然后將分離后的混合溶液進行收集并以20℃—30℃溫度進行恒溫保存，將固體殘渣返回到第三步繼續進行浸漬處理，且固體殘渣反復進行3—5次浸漬處理，然后分別將各次浸漬后得到的過濾液混合后行獨立存放，對經過過濾的固體殘渣進行0℃—5℃低溫存放，并作為后續作業原料；

第五步，萃取，將第四步制備的固體殘渣添加到微波萃取裝置中，然后向固體殘渣中添加總量為固體殘渣總量4—10倍的去離子水攪拌均勻，然后通過微波萃取裝置對混合物進行萃取作業，萃取作業時的萃取功率為300—600W，萃取時間為5—15分鐘，在完成萃取后，對混合物進行固液分離，然后對萃取液進行20℃—30℃溫度恒溫保存，對分離后的固體殘渣連續進行2—5次萃取作業后，將每次萃取作業后的萃取液進行混合，將最后一次萃取后的固體殘渣作為廢料無害化處理；

第六步，濃縮，將第五步得到的萃取液通過真空減壓濃縮設備進行濃縮，并得到濃度為0.1—0.5g/ml的濃縮液，其中真空減壓濃縮設備的濃縮壓力為-0.08MPa—-0.1MPa，濃縮溫度為30℃—60℃，并將濃縮液通過大孔樹脂進行吸附，并在大孔樹脂吸附完成后，用10℃—30℃去離子水進行清洗除雜；

第七步，洗脫，由60％—80％乙醇首先對第六步制備的濃縮液進行洗脫作業，且60％—80％乙醇量為第六步濃縮液量的3—5倍，然后對洗脫作業后的乙醇洗脫液進行濃縮，然后將乙醇洗脫液加到聚酰胺層析柱上，以比例為3：1的二氯甲烷—甲醇混合溶劑對乙醇洗脫液進行二次洗脫，然后再由聚酰胺膜對二次洗脫后的二次洗脫液進行收集，并對聚酰胺膜上Rf＝4—4.5的二次洗脫液進行流份并回收二次洗脫液，然后對回收后的二次洗脫液中添加丙酮并混合均勻后，對二次洗脫液進行洗滌干燥，即可獲得成品。

2.根據權利要求1所述的一種高效扁柏雙黃酮的制備方法，其特征在于：所述的第三步浸漬中，另通過超聲波震蕩裝置對混合物進行超聲波震蕩作業，且超聲波震蕩頻率為18—30KHz。

3.根據權利要求2所述的一種高效扁柏雙黃酮的制備方法，其特征在于：所述的超聲波設備的聲波傳播方向與混合物攪拌方向相反，并與混合液攪拌方向間呈30°—70°夾角，且超聲波設備至少兩個，并環繞混合液攪拌軸線均布。

4.根據權利要求1所述的一種高效扁柏雙黃酮的制備方法，其特征在于：所述的第四步中，對經過過濾的固體殘渣存放時間不得超過24小時。