[發明專利]一種高抗肺纖維化活性雪靈芝總黃酮的提取制備方法

在審

• 申請號: 201710369957.7
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107913299A
• 公開（公告）日: 2018-04-17
• 發明（設計）人: 劉增根;崔玉磊;邵贇;陶燕鐸
• 申請（專利權）人: 中國科學院西北高原生物研究所
• 主分類號: A61K36/36
• 分類號: A61K36/36;A61P11/00;A61P9/00;A61P29/00;A61P39/06
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙)32231
• 代理人: 康瀟

技術領域

本發明涉及一種高抗肺纖維化活性雪靈芝總黃酮的提取制備方法，尤其涉及一種以雪靈芝全草為原料的富含總黃酮的提取制備方法。

背景技術

雪靈芝學名甘肅蚤綴(Arenaria kansuensis Maxim.)，系石竹科(Caryophyllaceae)蚤綴屬(Arenaria L.)多年生墊狀草本植物，主要生于青藏高原海拔3700～5500m的高山草甸和礫石流帶，是當今地球上生長海拔最高的綠色開花植物之一，也是一種極為寶貴的野生藏藥資源。雪靈芝以全草入藥，其性味苦、寒，有清熱利肺、止咳、散腫、降血壓、通淋止痛之功效，常用于黃疸、淋病、子宮病、肺炎及各種肺病的治療。

隨著現代工業的快速發展，大氣污染日益嚴重，霧霾污染也日益加劇，有機粉塵吸入的增加，患間質性肺泡炎的越來越多，晚期則形成肺纖維化(Pulmonary fibrosis，PF)。近年來肺纖維化發病率和致死率呈不斷上升趨勢，研究表明肺纖維化與機體免疫能力下降以及肺間質組織受到損害有直接關系。目前臨床上用于治療PF的藥物如激素類及免疫抑制劑等，毒副作用大，療效差，尤其是老年人對糖皮質激素的耐受性差，因此，治療肺纖維化目前仍是一大難題。隨著中藥抑制PF單體活性成分的提取分離技術與藥理作用機制研究的進一步深入，以及具有新穎結構和較強生物活性的先導化合物的不斷發現，針對PF發病多因素特點將不同單味中藏藥中藥理作用明確的活性單體進行科學配伍，從PF發病的不同時期特點進行治療，研制出高效低毒的新型復方制劑應該是今后中藏藥治療PF的發展方向。

雪靈芝總黃酮是一類天然黃酮類化合物，其含有豐富的黃酮類、黃酮苷元及其苷、黃酮醇類、黃烷醇類等抗炎、抗氧化以及抗心腦血管和肺部疾病物質，因此雪靈芝總黃酮具有較高的防治心肺疾病、抗炎、清除自由基等多種生物活性。

目前，對黃酮的提取制備通常采用浸漬法、回流提取法、超聲提取法和微波提取法。其中：

浸漬法是一種傳統的天然產物提取方法，該法是指在室溫條件下將粉碎好的原料放入盛有適當溶劑的密閉容器中浸泡以溶出其中化學成分的方法。該方法操作過程相當費時，提取效率差，少則幾小時，多則需數周時間。同時要達到浸漬提取完全需要消耗大量溶劑，也可導致所提取化合物和原料的潛在丟失，如某些化合物如果在室溫下溶解性很差則不能被有效提取。另外，浸提液易霉變，需加入適量的防腐劑如甲苯、甲醛或氯仿等。

回流提取法是用易揮發的有機溶劑加熱回流提取植物成分的方法。該法主要使用低沸點的有機溶劑如乙醇、氯仿等加熱提取天然藥物中有效成分。為減少溶劑的揮發損失，保持與藥材持久的接觸，通過加熱浸出液，使溶劑受熱蒸發，經冷凝后變為液體流回浸出器，如此反復至浸出完全的一種熱提取方法。該方法操作較麻煩、提取時間長、溶劑消耗量較大，并且長時間的加熱回流會破壞熱不穩定的化合物。

超聲提取法是采用超聲波輔助提取溶劑進行提取的方法。主要利用超聲波的空化作用，破壞植物藥材細胞，使溶劑易于滲入細胞內，同時由于超聲波的強烈振動能，加強了胞內物質的釋放、擴散和溶解，加速有效成分的浸出。該方法提取溫度難以控制，對容器壁的厚薄及放置位置要求較高，目前尚為實驗室小規模使用，大規模生產還有待于解決設備問題。

微波提取法是一種主要利用微波強烈的熱效應對天然藥物中有效成分進行提取的方法。當被提取物和溶劑共處于快速振動的微波電磁場中時，目標組分的分子在高頻電磁波的作用下，高速振動產生熱能，使分子本身獲得巨大能量而得以掙脫周圍環境的束縛，實現分子自內向外的遷移，從而達到提取目的。該方法對儀器設備要求高，運行成本高，且應用范圍較窄。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是一種高抗肺纖維化活性雪靈芝總黃酮的提取制備方法，尤其提供一種以雪靈芝為原料、成本低廉、提取率高的雪靈芝總黃酮的提取制備方法。

為解決上述問題，本發明所涉及高抗肺纖維化活性雪靈芝總黃酮的提取制備方法，包括以下步驟：

⑴將雪靈芝全草經人工挑揀、清洗、除雜后，室內陰干，得到雪靈芝全草干樣；

⑵將上述干樣經粉碎后，過20～320目篩，得到雪靈芝粉；

⑶將所述雪靈芝粉與質量濃度為10～100％的乙醇按1：5～100的料液體積比在20～75℃溫度下進行水浴加熱提取，0.5～72h后得到浸提液；

⑷所述浸提液經膠體磨研磨1～20次后，得到膠體狀的雪靈芝浸提溶液；

⑸將所述膠體狀的雪靈芝浸提溶液在1～200Mpa的壓力下用高壓均質機進行均質后，經離心分離，得到上清液和濾渣；