[發明專利]一種在作物種子胚乳合成花青素的轉基因育種方法

有效

• 申請號: 201710368951.8
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107142276B
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 劉耀光;祝欽瀧;余穗澤;曾棟昌
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

1.一種在作物種子胚乳合成花青素的轉基因育種方法，其特征在于包括如下步驟：在作物中轉入包含6個表達結構蛋白的基因和2個表達轉錄因子的基因的基因組合，獲得種子胚乳為紫色的、合成花青素的轉基因作物；

其中，所述的結構蛋白為CHS、CHI、F3H、F3’H、DFR和ANS；

所述的轉錄因子為轉錄因子Pl和轉錄因子Lc；

表達所述的CHS的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP8、如SEQ ID NO.1所示的編碼查爾酮合成酶的基因和Tmas終止子；

表達所述的CHI的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP4、如SEQ ID NO.2所示的編碼查爾酮異構酶的基因和Tocs終止子；

表達所述的F3H的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP3、如SEQ ID NO.3所示的編碼黃烷酮-3-羥化酶的基因和T35s終止子；

表達所述的F3’H的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP7、如SEQ ID NO.4所示的編碼類烷酮-3-羥化酶的基因和Trbc終止子；

表達所述的DFR的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP5、如SEQ ID NO.5所示的編碼二羥黃酮醇4-還原酶的基因和Tags終止子；

表達所述的ANS的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP6、如SEQ ID NO.6所示的編碼花青素合成酶的基因和Tnos終止子；

表達所述的轉錄因子Pl的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP1、編碼玉米轉錄因子ZmPl的基因和Tmas終止子；

表達所述的轉錄因子Lc的基因包含水稻胚乳儲存蛋白基因啟動子ensP2、編碼玉米轉錄因子ZmLc的基因和Tmas終止子組成

其中，ensP1～ensP8啟動子的序列分別如GenBank No. EU264107、GenBank No.AY427569、GenBank No. AY427571、GenBank No. AY427575、GenBank No. EU264106、GenBank No. D63901、GenBank No. AY427572和GenBank No. AY427574所示；

Tmas終止子的序列如GenBank No.DQ005465所示；

Tocs終止子的序列如GenBank No.DQ005461所示；

T35s終止子的序列如GenBank No.AF234296.1所示；

Trbc終止子的序列如GenBank No.DQ005473所示；

Tags終止子的序列如GenBank No.DQ005453所示；

Tnos終止子的序列如GenBank No.DQ005463所示；

編碼玉米轉錄因子ZmPl的基因如GenBank No. NM_001112415所示；

編碼玉米轉錄因子ZmLc的基因如GenBank No. NM_001111869所示；

所述作物為水稻。