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[發明專利]一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法有效

專利信息
申請號: 201710367721.X 申請日: 2017-05-23
公開(公告)號: CN107200684B 公開(公告)日: 2021-04-20
發明(設計)人: 劉靜雯;馬亞瑞;李健;李桂玲 申請(專利權)人: 集美大學
主分類號: C07C51/42 分類號: C07C51/42;C07C51/47;C07C53/126;A01N37/02;A01P1/00;A61P35/00
代理公司: 廈門創象知識產權代理有限公司 35232 代理人: 尤懷成
地址: 361000 福*** 國省代碼: 福建;35
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 海洋 球石藻中 提取 肉豆蔻 方法
【權利要求書】:

1.一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:包括以下步驟:

步驟一、制備海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物:先用乙醇溶液浸提,獲得乙醇浸膏,再以乙酸乙酯為萃取劑進行萃取處理,合并萃取液,減壓濃縮得到海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物;

步驟二、反相硅膠柱層析制備肉豆蔻酸一次粗品:將獲得的海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物以反相硅膠柱進行層析處理,收集,檢測、合并、減壓濃縮至干,得到肉豆蔻酸一次粗品;

步驟三、葡聚糖凝膠柱Sephadex LH-20層析制備肉豆蔻酸二次粗品:將肉豆蔻酸一次粗品以葡聚糖凝膠柱Sephadex LH-20進行層析處理,收集,檢測、合并、減壓濃縮至干,得到肉豆蔻酸二次粗品;

步驟四、反相硅膠柱層析制備肉豆蔻酸一次精品:將獲得的肉豆蔻酸二次粗品以反相硅膠柱進行層析處理,收集,檢測、合并、減壓濃縮至干,得到肉豆蔻酸一次精品;

步驟五、正相硅膠柱層析制備肉豆蔻酸二次精品:將獲得的肉豆蔻酸一次精品以正相硅膠柱進行層析處理,收集,檢測、合并、減壓濃縮至干,得到肉豆蔻酸二次精品;

步驟六、PTLC制備肉豆蔻酸純品:將獲得的肉豆蔻酸二次精品進行PTLC,點樣、展開,刮板,樣品回收,保存于-20℃,得到肉豆蔻酸純品。

2.如權利要求1所述的一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:所述步驟一的具體方法為:海洋球石藻生長至穩定期,收獲,冷凍干燥獲得海洋球石藻藻粉,用質量分數為75%的乙醇溶液浸提,獲得乙醇浸膏,加入等體積的乙酸乙酯和水,反復萃取,收集乙酸乙酯相,合并、減壓濃縮至干,獲得海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物。

3.如權利要求1所述的一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:所述步驟二的具體方法為:將海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物用適量的分析純甲醇溶解,加入量以甲醇正好沒過萃取物為宜,進行反相硅膠柱層析;依次用水,質量分數為25%的甲醇溶液,質量分數為50%的甲醇溶液,質量分數為75%的甲醇溶液,甲醇洗脫,每個梯度洗脫1.5L,流速控制為30mL/min,每200mL收集1管,旋蒸,初步用TLC分析流出物,合并肉豆蔻酸高濃度流分段,減壓濃縮至干,獲得肉豆蔻酸一次粗品。

4.如權利要求1所述的一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:所述步驟三的具體方法為:將肉豆蔻酸一次粗品用適量甲醇溶解后,上葡聚糖凝膠柱SephadexLH-20,用甲醇作為洗脫劑進行洗脫,流速控制20S/drop,使用自動收集器收集各餾分,每30min收集一管,初步用TLC分析流出物,合并21至25管的餾分,減壓濃縮至干,獲得肉豆蔻酸二次粗品。

5.如權利要求1所述的一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:所述步驟四的具體方法為:將肉豆蔻酸二次粗品,依次采用質量分數為60%,70%,80%,90%,100%的丙酮溶液體系梯度進行RP C18反相硅膠柱層析,每個梯度洗脫200mL,流速控制為10mL/min,旋蒸,初步用TLC分析流出物,合并肉豆蔻酸高濃度流分段,減壓濃縮至干,獲得肉豆蔻酸一次精品。

6.如權利要求1所述的一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:所述步驟五的具體方法為:將肉豆蔻酸一次精品經過正相硅膠柱層析:用硅膠粉拌樣,硅膠用正己烷飽和后裝柱,樣品上柱后用正己烷乙醚的體系進行洗脫,所述正己烷和乙醚的體積比為50:1,添加2滴冰醋酸,收集餾分,合并63-67管,減壓濃縮至干,獲得肉豆蔻酸二次精品。

7.如權利要求1所述的一種從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法,其特征在于:所述步驟六的具體方法為:將肉豆蔻酸二次精品經過PTLC,最終得到肉豆蔻酸:采用高效薄層層析板,在體積比為:石油醚:乙酸乙酯=15:1的展開劑中展開,前后兩端顯色,用刀片刮取中間部分,合并,用甲醇溶解,離心,收集上清液,減壓濃縮至干,最終得到肉豆蔻酸。

8.一種如權利要求1-7中任一項所述的從海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法提取的肉豆蔻酸在制備抗大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、副溶血性弧菌及金黃色葡萄球菌藥劑中的應用。

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