[發明專利]擴增檢測玉米opaque11基因用分子標記的特異性引物組及其應用

有效

• 申請號: 201710363434.1
• 申請日: 2017-05-22
• 公開（公告）號: CN107400706B
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發明（設計）人: 宋任濤;馮帆;祁巍巍;唐遠平
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 顧勇華

本發明涉及一種擴增檢測玉米opaque11基因用分子標記的特異性引物組及其應用。該特異性引物組中擴增該opaque11基因左側DNA片段的一對特異性引物SSR946的堿基序列為：正向引物從5′端至3′端為：GTGCCTGATAAAGAAGCTGG；反向引物從5′端至3′端為：GAAAAAAATCGCTATGGCTAA；擴增該opaque10基因右側DNA片段的一對特異性引物SSR456的堿基序列為：正向引物從5′端至3′端為：GCTAGGTCGTCGGAAGTT；反向引物從5′端至3′端為：ATGCCAGTATGAATGAGTGA。利用這兩對特異性引物組能對玉米任何時期和任何組織的DNA進行基因型鑒定，檢測雜交育種子代各單株中opaque11基因的存在與否以及雜合或純合狀態。這種檢測方法的準確性高，操作簡單，為利用opaque11基因的DNA分子標記輔助育種提供重要的技術手段。

技術領域

本發明涉及一種擴增檢測玉米opaque11基因用分子標記的特異性引物組及其應用。

技術背景

玉米（Zea mays L.）是一年生草本植物，隸屬于禾本科玉米屬。原產于中美洲，是世界三大糧食作物之一。玉米的適應性很強，分布廣，用途多，增產潛力大，在全世界播種面積和總產量僅次于水稻和小麥，居第三位。我國不僅是世界玉米的主要生產國，也是玉米的主要消費國。玉米的下游產業鏈長，涉及種植、養殖、食品、化工、醫藥等諸多行業。現今全世界約有三分之一人口以玉米作為主要食糧，其中亞洲人的食物組成中玉米占50%, 多者達90%以上 , 非洲占25%, 拉丁美洲占40%。玉米同時是家畜、家禽的上等精飼料，對提高豬肉、牛乳和蛋類產品的產量和品質有顯著作用。玉米還是主要的工業原料，被廣泛用于食品、醫藥、紡織等工業部門。我國對于玉米的消費量和需求一直在不斷的增長中。因此，這對玉米產量和品質的改良與創新提出了更高的要求。

玉米籽粒的蛋白質含量約為8.6%左右，其中賴氨酸，蛋氨酸等氨基酸的含量較低。為了提高玉米品質和營養價值，國內外科研人員以玉米籽粒突變體為材料，借助于遺傳學的研究手法對其進行改造，提高其營養價值。在玉米中，有一類與蛋白品質相關的突變體，被稱為Opaque或Floury突變體。在表型上，這類突變體胚乳細胞內的主要儲藏細胞器淀粉粒和蛋白體包裝不緊密，造成籽粒胚乳結構疏松，比較容易粉碎，所以與野生型的透明籽粒相比容易消化，適口性好，更適合用于優質飼料的加工。生化方面，這類突變體能夠顯著提高玉米籽粒中賴氨酸等必需氨基酸的含量，進而提高玉米的營養價值。其中最為有名的是Opaque2（o2）突變體, 世界上許多國家利用opaque 2 基因 (o2) 進行玉米蛋白的研究和改良工作, 并取得了顯著成績。o2 基因的突變能夠降低醇溶蛋白在胚乳蛋白中的比例、顯著提高玉米籽粒胚乳蛋白中賴氨酸含量的隱性突變基因。