[發(fā)明專利]禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法

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• 申請日: 2017-05-22
• 公開（公告）號: CN108929854A
• 公開（公告）日: 2018-12-04
• 發(fā)明（設計）人: 邵萬均
• 申請（專利權）人: 邵萬均
• 主分類號: C12N1/02
• 分類號: C12N1/02;C12N1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法，將禾本科植物幼苗從莖稈基部截斷，整體帶回操作室；將幼苗放入0.5％次氯酸鈉溶液中清洗20至25秒，使用清水清洗3至4次后放在無菌紙上干燥待用；將幼苗放入預先高溫高壓滅菌的搗碎器中進行搗碎；將幼苗漿液通過移液槍注射到玻璃培養(yǎng)瓶中；將培養(yǎng)瓶進行密封并放入搖床中28攝氏度培養(yǎng)6至10天；將培養(yǎng)瓶中的內生真菌菌落挑出放置到玻璃皿的培養(yǎng)基上進行單獨培養(yǎng)，獲得內生真菌菌株。相比現(xiàn)有技術，本發(fā)明具有真菌分離率高、雜菌含量少、操作簡單、使用方便的特點。

技術領域

本發(fā)明涉及真菌分離領域，尤其涉及一種禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法。

背景技術

禾本科(學名：Gramineae)別稱早熟禾科，分為620多屬，10000多種，中國有190余屬約1200種。地球陸地大約有20％覆蓋著草，禾本科包括多種俗稱作某某草的植物。但是必須指出，不是所有的草都是禾本科植物；同樣，并不是所有禾本科植物都是低矮的草，就如竹子，也可以高達十數(shù)米，連片成林。禾本科包含了許多重要的糧食作物。

研究發(fā)現(xiàn)，內生真菌可以侵染多個禾本科植物品種，對其產生傷害。在禾本科植物幼苗時期進行內生真菌的檢測和分離，顯得尤為重要。

發(fā)明內容

發(fā)明目的：針對現(xiàn)有技術的不足與缺陷，本發(fā)明提供一種真菌分離率高、雜菌含量少、操作簡單、使用方便的禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法。

技術方案：本發(fā)明所述的禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法，其特征在于：包括下述步驟，

(1)將禾本科植物幼苗從莖稈基部截斷，整體帶回操作室；

(2)將幼苗放入0.5％次氯酸鈉溶液中清洗20至25秒，使用清水清洗3至4次后放在無菌紙上干燥待用；

(3)將步驟(2)獲得的幼苗放入預先高溫高壓滅菌的搗碎器中進行搗碎；

(4)將步驟(3)獲得的幼苗漿液通過移液槍注射到玻璃培養(yǎng)瓶中；

(5)將培養(yǎng)瓶進行密封并放入搖床中28攝氏度培養(yǎng)6至10天；

(6)將培養(yǎng)瓶中的內生真菌菌落挑出放置到玻璃皿的培養(yǎng)基上進行單獨培養(yǎng)，獲得內生真菌菌株。

其中，所述的步驟(3)的搗碎器為陶瓷搗碎器。

其中，所述的步驟(4)的移液槍頭通過預先的高溫高壓滅菌操作。

其中，所述的步驟(6)的培養(yǎng)基為土豆瓊脂培養(yǎng)基。

有益效果：與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下顯著優(yōu)點：本發(fā)明的禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法真菌分離率高、雜菌含量少、操作簡單、使用方便。

具體實施方式

實施例1：

本實施例的禾本科植物幼苗中內生真菌的分離方法，包括下述步驟，

(1)將禾本科植物幼苗從莖稈基部截斷，整體帶回操作室；

(2)將幼苗放入0.5％次氯酸鈉溶液中清洗20秒，使用清水清洗3次后放在無菌紙上干燥待用；

(3)將步驟(2)獲得的幼苗放入預先高溫高壓滅菌的陶瓷搗碎器中進行搗碎；

(4)將步驟(3)獲得的幼苗漿液通過移液槍注射到玻璃培養(yǎng)瓶中，移液槍頭通過預先的高溫高壓滅菌操作；

(5)將培養(yǎng)瓶進行密封并放入搖床中28攝氏度培養(yǎng)6天；

(6)將培養(yǎng)瓶中的內生真菌菌落挑出放置到玻璃皿的土豆瓊脂培養(yǎng)基上進行單獨培養(yǎng)，獲得內生真菌菌株。

實施例2：