[發明專利]CDK4通路抑制劑在肢端型黑色素瘤治療中的應用

在審

• 申請號: 201710362227.4
• 申請日: 2017-05-19
• 公開（公告）號: CN106995854A
• 公開（公告）日: 2017-08-01
• 發明（設計）人: 郭軍;孔燕
• 申請（專利權）人: 郭軍;孔燕
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;A61K31/519;A61P35/00
• 代理公司: 北京邦信陽專利商標代理有限公司11012
• 代理人: 王惠,陳悅軍

技術領域

本發明屬于醫療領域，涉及一種CDK4通路抑制劑的應用。

背景技術

黑色素瘤是由黑色素細胞惡變導致的惡性腫瘤，近年來，其發病率呈現明顯增加趨勢。根據發病部位及受陽光損傷程度，惡性黑色素瘤可分為四種亞型：慢性陽光損傷型(CSD)、非慢性陽光損傷型(non-CSD)、肢端型(AM)和粘膜型。由于遺傳背景的不同，白種人黑色素瘤以非肢端皮膚黑色素瘤為主型，肢端型和粘膜型黑色素瘤的發病比例僅占5％和1％；而黃種人黑色素瘤以肢端型和粘膜型為主型，兩者比例約占黑色素瘤的70％。

肢端型黑色素瘤通常發生在手掌、腳掌和指甲。與非肢端皮膚黑色素瘤相比，肢端型黑色素瘤具有更強的侵襲性，患者往往預后更差。目前，肢端型黑色素瘤的常規化療、免疫治療、靶向治療尚缺乏系統的國際治療規范，這可能與臨床研究中肢端型患者比例較少有關。在黑色素瘤治療領域中，現在針對BRAF、C-KIT基因突變的特異性靶向治療及以PD-1、CTLA-4為代表的免疫療法在很大程度上提高了晚期黑色素瘤的治療效果。然而在肢端型黑色素瘤中，BRAF、C-KIT基因突變頻率僅為15.5％和11.9％。因此，需要尋找新的、有效的治療靶點以治療肢端型黑色素瘤。

發明內容

本發明基于對肢端型黑色素瘤患者的重要驅動基因拷貝數變異分析，提供一種新的治療靶點和制劑，為肢端型黑色素瘤的診斷和治療提供一種新的途徑。

在第一個方面，本發明提供一種輔助診斷和/或治療肢端型黑色素瘤的基因標志物，所述標志物包括基因CDK4、CCND1和P16^INK4a中的一個或兩個。

優選地，所述基因CDK4(NG_007484.2RefSeqGene)、CCND1(NG_007375.1RefSeqGene)和P16^INK4a(NG_007485.1RefSeqGene)的拷貝數存在變化。所述拷貝數變化是與正常型或野生型相比的數量變化。

在第二個方面，本發明提供一種肢端型黑色素瘤輔助診斷和/或治療用藥指導的多重基因檢測試劑盒，所述試劑盒用于檢測本發明的基因標志物。優選地，所述試劑盒用于檢測基因標志物的拷貝數。

優選地，所述試劑盒包括檢測基因CDK4、CCND1和P16^INK4a的探針；進一步優選地，所述探針為Applied Biosystems公司的貨號分別為：CDK4:HS02225231_CN、P16^INK4a:HS03717141_CN和CCND1:HS03803699_CN的探針。所述PCR檢測系統以Rnase P基因作為參考基因，無核苷酸水代替模板為陰性對照，正常皮膚DNA作為正常參照。PCR反應體系：20μL，包括：Genotyping Master Mix 10μL，Copy Number Target Assay 1μL、Copy Number Reference Assay(Rnase P)1μL、DNA模板80ng/孔、雙蒸餾水補足(8-DNA模板體積)。

優選地，所述試劑盒包括檢測基因CDK4、CCND1和P16^INK4a的PCR擴增引物。

在第三個方面，本發明提供所述基因標志物在制備與肢端型黑色素瘤相關的輔助診斷和/或治療的制劑或試劑盒中的應用。

在第四個方面，本發明提供一種用于治療肢端型黑色素瘤的制劑，所述制劑包含CDK4通路抑制劑。

在第五個方面，本發明提供CDK4通路抑制劑在制備治療肢端型黑色素瘤的藥物中的應用。

在本發明中，優選地，所述肢端型黑色素瘤為CCND1拷貝數擴增的肢端型黑色素瘤、CDK4拷貝數擴增+P16^INK4a拷貝數減少的肢端型黑色素瘤、CCND1拷貝數擴增+P16^INK4a拷貝數減少的肢端型黑色素瘤或CDK4拷貝數擴增+CCND1拷貝數擴增的肢端型黑色素瘤。

優選地，所述CDK4通路抑制劑為PD0332991，其結構如式I所示：

PD0332991(Palbociclib)是一種高度選擇性的CDK4/6抑制劑，對其他CDK幾乎沒有抑制活性。PD 0332991通過抑制細胞進入S期，有效抑制細胞生長，抑制DNA復制。臨床前研究表明，PD 0332991能夠有效誘導腫瘤細胞生長停滯和殺死細胞。該藥目前已經美國FDA批準應用于晚期乳腺癌聯合治療。