[發明專利]一種蛹蟲草液體菌種的培育方法和應用及其使用的培養液

在審

• 申請號: 201710360091.3
• 申請日: 2017-05-20
• 公開（公告）號: CN107058134A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 沈中奇;李盈
• 申請（專利權）人: 天津市東方中濱農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01G1/04;C12R1/645
• 代理公司: 天津市尚文知識產權代理有限公司12222
• 代理人: 李寧

技術領域

本發明涉及應用生物技術原理人工培育真菌的技術領域，具體涉及蛹蟲草的培育，更具體地涉及一種蛹蟲草液體菌種的培育方法和應用及其使用的培養基。

背景技術

蛹蟲草（Cordyceps militaris）隸屬于真菌界（Fungi）、子囊菌門（Ascomycota）、子囊菌綱（Ascomycetes）、糞殼菌亞綱（Sordariomycetidae）、肉座菌目（Hypocreales）、麥角菌科（Clavicipitaceae）、蟲草屬（Cordyceps）。蛹蟲草是非常著名的藥食兩用的子囊真菌，也是獲得蟲草素的主要來源，具有很高的開發利用價值。近年來，隨著野生冬蟲夏草資源的日漸枯竭，其價格不斷攀升，從而促使人們尋找野生冬蟲夏草的替代品。由于蛹蟲草具有與冬蟲夏草相近的藥用與食用價值，加之蛹蟲草更加容易馴化，因此受到人們越來越多的關注。

但是，由于傳統工藝中液體配方的營養不全面，導致蛹蟲草發菌慢，菌絲較易老化，長勢弱，菌絲體色澤較暗，子實體產量低。因此，我們對液體菌種的培養液配方、液體菌種的培育方法進行了改良。

發明內容

本發明提供了一種蛹蟲草液體菌種的培育方法，該方法包括：

將蛹蟲草的純菌種接種到液體培養基中，搖床培養得到液體菌種；

所述液體培養基按照重量份數計，包括：馬鈴薯9-10份，鮮蠶蛹9-10份的浸出液，葡萄糖0.8-1份，蛋白胨0.8-1份，酵母浸粉0.8-1份，磷酸二氫鉀0.09-0.1份，硫酸鎂0.04-0.05份，脫脂蠶蛹粉0.09-0.1份，氫氧化鈉0.0005-0.0006份，水45-60份，維生素B1 0.01-0.02份；

所述水的重量份數包含蠶蛹浸出液中的水。

本發明通過液體菌種的特定配方并結合搖床培養，可良好保持菌種的遺傳特性，減少菌種在菌絲分解斷裂中出現的退化，保持菌種活力和發菌速度，促進后續菌絲體的轉色，增加子實體產量。解決了蛹蟲草菌種退化、發菌弱、后期轉色慢、子實體產量少等問題。

進一步，所述液體培養基按照重量份數計，包括：馬鈴薯9.5份，鮮蠶蛹9.5份的浸出液，葡萄糖0.95份，蛋白胨0.95份，酵母浸粉0.95份，磷酸二氫鉀0.095份，硫酸鎂0.048份，脫脂蠶蛹粉0.095份，氫氧化鈉0.00057份，水47份，維生素B1 0.014份；所述水的重量份數包含蠶蛹浸出液中的水。

進一步，所述搖床培養的條件為：以200-250r/min搖床培養5-6天，培養溫度為20-22℃。

進一步，所述蠶蛹浸出液為將鮮蠶蛹煮制25-35min后得到的蠶蛹過濾液。

進一步，所述馬鈴薯的蛋白質含量不低于3%，淀粉含量不低于13%，優選13%-15%。

進一步，所述蛋白胨的總氮含量不低于13.5%，氨基酸含量不低于3%。

進一步，所述脫脂蠶蛹粉的蛋白質含量為60%-80%，脂肪含量為5%-8%。

本發明蛹蟲草液體菌種的培育方法可廣泛用于蛹蟲草的培育中，從而提高蛹蟲草子實體的生產效率和產量。

本發明還提供一種培育蛹蟲草的方法，包括：將上述蛹蟲草液體菌種的培育方法制備的液體菌種轉接至子實體培養基，繼續進行培養。

進一步，將蠶蛹浸出液使用過的蠶蛹放入子實體培養基中。

本發明提供一種培育蛹蟲草液體菌種的培養液，按照重量份數計，包括：馬鈴薯9-10份，鮮蠶蛹9-10份的浸出液，葡萄糖0.8-1份，蛋白胨0.8-1份，酵母浸粉0.8-1份，磷酸二氫鉀0.09-0.1份，硫酸鎂0.04-0.05份，脫脂蠶蛹粉0.09-0.1份，氫氧化鈉0.0005-0.0006份，水45-60份，維生素B1 0.01-0.02份；所述水的重量份數包含蠶蛹浸出液中的水。

本發明上述的培養液可用于蛹蟲草液體菌種的培育，使獲得的菌種不易退化，保持菌種活力和發菌速度，促進后續菌絲體的轉色，增加子實體產量。

具體實施方式

在蛹蟲草的液體菌種培育方法中，按照不同的配方進行培養制作得到的菌種的退化程度和抵抗力不同。其將固體試管種轉接到液體搖床培養液中，通過有一段時間的培養得到搖床液體菌種，再將液體菌種再轉接到子實體培養基中，繼續培養一段時間見光，進行子實體培養即可得到污染率低、高產的蟲草子實體。通過不同的培養液培養的蛹蟲草菌種的生長特性和子實體產量有很大差別，通過本發明培養液配方制作的液體菌種使得菌種菌絲體多，菌種特性穩定，能夠高效的繁殖和生長。