[發明專利]檸檬多酚的高濃度發酵方法

在審

• 申請號: 201710355632.3
• 申請日: 2017-05-19
• 公開（公告）號: CN106962714A
• 公開（公告）日: 2017-07-21
• 發明（設計）人: 郭佳琛;陳韋廷
• 申請（專利權）人: 惠州嘉聯生物科技開發有限公司
• 主分類號: A23L2/02
• 分類號: A23L2/02;A23L33/10;A23L29/00
• 代理公司: 惠州市超越知識產權代理事務所(普通合伙)44349
• 代理人: 魯慧波

1.檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：包括：提供一檸檬皮汁，為將含皮的整顆檸檬榨汁所獲得；提供一植物內生菌；提供一藻類發酵產物；混合該檸檬皮汁、該植物內生菌及該藻類發酵產物，以形成一混合物，使該混合物中的菌類物質最終濃度為2.8×10⁵CFU/ml-3.6×10⁶CFU/ml；以該植物內生菌及藻類發酵產物共同發酵該檸檬皮汁，其中發酵溫度為17℃-37℃，發酵時間為30-60天，以獲得一檸檬皮汁發酵液。

2.如權利要求1所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：發酵溫度為17℃-28℃。

3.如權利要求1所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：發酵時間為40-50天。

4.如權利要求2所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：發酵溫度為26℃。

5.如權利要求3所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：發酵時間為45天。

6.如權利要求1所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：該混合物為由該檸檬皮汁、植物內生菌的菌液及藻類發酵產物所組成。

7.如權利要求1項所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：該混合物中，該植物內生菌及藻類發酵產物的菌數相同。

8.如權利要求1項所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：所述植物內生菌的提取方法為：采用組織塊法，取新鮮杜仲即杜仲科植物的樹皮，表面消毒處理后，接種至PDA（分離內生真菌）和高氏一號培養基（分離內生放線菌）上培養7-10d，然后分離單菌落；從活化斜面中挑取菌絲塊接種于裝有100mL發酵培養基的錐形瓶中，置28℃，200r/min搖床振蕩培養7d；發酵培養物除去菌體，濾液用等體積乙酸乙酯萃取3次，合并有機相，55℃減壓濃縮蒸干，即為菌液粗提物；離心和過濾得到的菌體，用適量95%乙醇冷凝回流3次，合并乙醇相，減壓濃縮蒸干，即為菌體粗提物；置4℃冰箱保存備用。

9.如權利要求1項所述的檸檬多酚的高濃度發酵方法，其特征在于：所述藻類發酵產物為裂壺藻發酵產物，其制備方法為：取經過清洗的裂壺藻原料，設定酶解條件為料液比1∶10（m/V）、纖維素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、溫度55℃、pH4.5、反應時間1.3h，進行酶解，纖維素酶水解結束后，沸水浴滅酶15min，9000r/min離心，收集上清液得到裂壺藻纖維素酶水解液；裂壺藻酶解液滅酶活后，調節pH值至6.2-6.6，高壓蒸汽滅菌（121℃，20min），然后接種體積分數1%的MRS培養基活化的戊糖片球菌液到裂壺藻酶解液，37℃恒溫培養箱靜置，進行發酵；發酵結束后，9000r/min離心，收集上清液得到裂壺藻發酵產物。