[發明專利]狼瘡抗凝物檢測用試劑盒及狼瘡抗凝物存在與否判斷方法

有效

• 申請號: 201710355548.1
• 申請日: 2017-05-19
• 公開（公告）號: CN107589251B
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 王連升;李紅梅
• 申請（專利權）人: 上海原科實業發展有限公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531
• 代理公司: 上海宏京知識產權代理事務所(普通合伙) 31297
• 代理人: 趙霞

1.狼瘡抗凝物檢測用試劑盒，其特征在于，包括

第1凝固時間測定試劑，其包含凝血因子激活劑、大豆磷脂，CaCl₂和緩沖液；

第2凝固時間測定試劑，其包含凝血因子激活劑、氫化磷脂，CaCl₂和緩沖液；

所述第1凝固時間測定試劑中包含2-10mg/L的凝血因子激活劑、5-20mg/L的大豆磷脂、10-50mmol/L的CaCl₂和20-80mmol/L pH＝7-8的緩沖液；所述第2凝固時間測定試劑中包含2-10mg/L的凝血因子激活劑、10-40mg/L的氫化磷脂、10-50mmol/L的CaCl₂和20-80mmol/LpH＝7-8的緩沖液；

所述試劑盒的用途為判斷狼瘡抗凝物存在與否通過包括下列步驟的方法實施：

S1，將≥30人健康正常血漿分別與第1凝固時間測定試劑、第2凝固時間測定試劑混合，獲得正常血漿第1凝固時間范圍T1、正常血漿第1凝固時間與第2凝固時間比值范圍T2；

S2，將從受試者采集的待測血漿平均分成兩份；

S3，將S2中分成兩份的其中之一和第1凝固時間測定試劑混合來測定第1凝固時間；

S4，根據第1凝固時間與T1的關系，判斷待測樣品是否含狼瘡抗凝物；

其中S4步驟后還包括：

S5，將S2中分成兩份的另外一份和第2凝固時間測定試劑混合來測定第2凝固時間；

S6，以第1凝固時間和第2凝固時間的比值來判斷上述待測血漿是否含狼瘡抗凝物；

所述正常血漿第一凝固時間與第二凝固時間的比值參考范圍為0.9-1.2。

2.如權利要求1所述的狼瘡抗凝物檢測用試劑盒，其特征在于，所述第1凝固時間測定試劑和第2凝固時間測定試劑中的凝血因子激活劑為RVV-X，緩沖液為三羥甲基氨基甲烷-鹽酸溶液。

3.如權利要求1所述的狼瘡抗凝物檢測用試劑盒，其特征在于，所述第1凝固時間測定試劑和第2凝固時間測定試劑中還包含蛋白保護劑、防腐劑、離子強度調節劑和凝血因子保護劑。

4.如權利要求3所述的狼瘡抗凝物檢測用試劑盒，其特征在于，所述第1凝固時間測定試劑和第2凝固時間測定試劑中還分別包含22-70g/L蛋白保護劑、0.03-0.05％防腐劑、80-300mmol/L離子強度調節劑和1-6g/L凝血因子保護劑，上述百分數為體積百分數。

5.如權利要求3或4任一項所述的狼瘡抗凝物檢測用試劑盒，其特征在于，所述蛋白保護劑為A組分和B組分的復配物，所述A組分為BSA、酪蛋白或脫脂奶粉，所述B組分為海藻糖、甘露醇或蔗糖；所述的防腐劑為Proclin300，所述的離子強度調節劑為NaCl、KCl或MgCl₂，所述的凝血因子保護劑為甘氨酸、組氨酸或精氨酸。

6.下列試劑用于制備判斷狼瘡抗凝物存在與否的試劑盒的用途：

(i)第1凝固時間測定試劑，其包含凝血因子激活劑、大豆磷脂，CaCl₂和緩沖液；

(ii)第2凝固時間測定試劑，其包含凝血因子激活劑、氫化磷脂，CaCl₂和緩沖液；

其中判斷狼瘡抗凝物存在與否通過包括下列步驟的方法實施：

S1，將≥30人健康正常血漿分別與第1凝固時間測定試劑、第2凝固時間測定試劑混合，獲得正常血漿第1凝固時間范圍T1、正常血漿第1凝固時間與第2凝固時間比值范圍T2；

S2，將從受試者采集的待測血漿平均分成兩份；

S3，將S2中分成兩份的其中之一和第1凝固時間測定試劑混合來測定第1凝固時間；

S4，根據第1凝固時間與T1的關系，判斷待測樣品是否含狼瘡抗凝物”。

7.如權利要求6所述的用途，其中S4步驟后還包括：

S5，將S2中分成兩份的另外一份和第2凝固時間測定試劑混合來測定第2凝固時間；

S6，以第1凝固時間和第2凝固時間的比值來判斷上述待測血漿是否含狼瘡抗凝物”。