[發(fā)明專利]一種食品中游離氨基酸含量的測定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710352772.5
• 申請(qǐng)日: 2017-05-18
• 公開（公告）號(hào): CN107192775B
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龔霄;齊寧利;林茂;王曉芳;魏曉奕;林麗靜;馬麗娜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所;貴州省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展研究所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李佳

1.一種食品中游離氨基酸含量的測定方法，其特征在于，包括以下步驟：

對(duì)質(zhì)量為m的待檢測物預(yù)處理，得到體積為V的檢測液；

將所述檢測液進(jìn)行柱前衍生化，得到衍生化的檢測液；

采用超臨界流體色譜儀檢測所述衍生化的檢測液中氨基酸的含量，得到檢測液所含的氨基酸的質(zhì)量濃度；

所述超臨界流體色譜儀的檢測條件為：色譜柱的直徑為3.0mm、柱長為100mm、填料粒徑為1.7μm，填料為高密度二醇；流動(dòng)相為超臨界二氧化碳和含有甲酸銨的甲醇乙腈溶液，其中，甲醇與乙腈的體積比為1：0.9-1.1，甲酸銨在所述甲醇乙腈溶液中的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.18％-0.22％；采用梯度洗脫，超臨界二氧化碳在不同時(shí)間段的體積百分比為：0-0.2min為100％-95％，0.2-5.0min為90％-70％，5.0-10.5min為80％-60％，10.5-16.0min為90％-70％，16.0-17.0min為95％-100％；

分析時(shí)間：3.5-16.0min；柱溫：40-60℃；備壓：1500-3000psi；進(jìn)樣量：0.2-10μl；流速：1.0-3.0mL/min；檢測波長為280nm；

通過以下公式分別計(jì)算得到所述待檢測物中氨基酸的含量：(質(zhì)量濃度*V)/m；

所述衍生化為：依次加入pH為9.0±0.2的1±0.02mol/L硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液、甲醇、檢測液、乙氧基亞甲基丙二酸二乙酯，混合后超聲處理10-20min，然后在60-80℃下水浴1.0h以上，去除過量的衍生化試劑；

其中，硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液、甲醇、檢測液和乙氧基亞甲基丙二酸二乙酯的體積比為25：24：24-26：1。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、谷氨酸、脯氨酸、絲氨酸、天冬氨酸、精氨酸、蘇氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸、酪氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述待檢測物包括植物組織、果酒、飲料、食品添加劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，若待檢測物為液體，則所述預(yù)處理為直接取樣；

若待檢測物為植物組織，所述預(yù)處理為：將待檢測物粉碎，等體積比加入鹽酸，混合后離心得到上清液為所述檢測液；

若待檢測物為固體飲料、食品添加劑，所述預(yù)處理為：取待檢測物，加入鹽酸，使待檢測物在鹽酸中的濃度為0.8-1.5g/L，混合后離心得到上清液為所述檢測液；

所述鹽酸溶液的濃度為0.2±0.02mol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液、甲醇、檢測液和乙氧基亞甲基丙二酸二乙酯的體積比為25：24：25：1。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，去除過量的衍生化試劑后還過濾，所述過濾采用0.22μm尼龍膜進(jìn)行。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述進(jìn)樣體積為0.2-3.0μl。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述備壓為1800psi。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的測定方法，其特征在于，所述流速為2mL/min。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的測定方法，其特征在于，所述超臨界流體色譜儀檢測時(shí)，波長補(bǔ)償范圍為330-430nm。