[發明專利]分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系及其應用

有效

• 申請號: 201710349810.1
• 申請日: 2017-05-17
• 公開（公告）號: CN107177558B
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: 于力;周國輝;王海偉;楊德成
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/569;C12R1/91
• 代理公司: 11598 北京思元知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 余光軍;霍雪梅

本發明公開了分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系及其應用。本發明首先公開了一株分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系，其微生物保藏編號為CGMCC No.13841。本發明進一步公開了所述雜交瘤細胞系分泌的口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10。間接免疫熒光檢測顯示，單克隆抗體10B10為一株血清型共享性單抗，其與O、A和Asia1型口蹄疫病毒均呈特異性反應。以本發明所述單克隆抗體10B10作為檢測抗體，能夠用于A、O和Asia1型口蹄疫病毒抗原或抗體的特異性檢測。本發明所述口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10及其雜交瘤細胞系在口蹄疫的診斷或防治中具有應用前景。

技術領域

本發明涉及分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系，還涉及所述雜交瘤細胞系及其分泌的口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10在口蹄疫診斷或防治中的應用，屬于口蹄疫的防治領域。

背景技術

口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV)屬于小RNA病毒科口蹄疫病毒屬的成員，其基因組為單股正鏈RNA，基因組RNA全長約8.5kb。口蹄疫(foot-and-mouthdisease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的，嚴重危害牛、豬、羊等多種偶蹄動物的高度接觸性傳染病，能夠引起幼畜死亡、產奶量下降、肉食減少、肉品下降、動物的生產性能降低等，而且該病具有極強的傳染性，可形成大范圍流行，造成巨大的經濟損失。預防和控制口蹄疫的關鍵是高效疫苗和準確的診斷方法的應用。

口蹄疫病毒有七個血清型，分別為O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asial，各血清型之間無交叉免疫保護。目前，中國主要流行O型、A型和Asial型FMD。口蹄疫病毒的抗原結構十分復雜，不同血清型、基因型和分離株的抗原位點和抗原表位都不盡相同，存在廣泛的抗原變異。因此，開發新的口蹄疫病毒共享型單克隆抗體，將對于口蹄疫的有效防控具有重要意義。

發明內容

本發明所要解決的第一個技術問題是提供一株分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系以及其分泌的口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10；

本發明所要解決的第二個技術問題是將上述分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系及其分泌的單克隆抗體10B10應用于口蹄疫的診斷或防治。

為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是：

本發明首先公開了一株分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系。

本發明用滅活并純化的A型口蹄疫毒株A/JLYS/CHA/2014免疫BALB/c鼠，將免疫小鼠脾細胞與SP2/0細胞融合獲得雜交瘤細胞。抗體陽性雜交瘤細胞經3次有限稀釋法亞克隆，獲得三株能穩定分泌抗體的雜交瘤細胞，分別命名為10B10、3C7和4G2。間接免疫熒光檢測結果顯示，單抗10B10與A、O、Asia1型毒株均呈陽性反應，表明10B10為FMDV血清型共享性單抗；而單抗3C7和4G2僅與O型毒株均呈陽性反應，為O型毒株特異性單抗。

本發明將分泌口蹄疫病毒共享型單克隆抗體10B10的雜交瘤細胞系10B10提交專利認可的機構進行保藏，其微生物保藏編號為：CGMCCNo.13841；分類命名為：分泌FMDV共享型單克隆抗體的雜交瘤細胞株。保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏時間是2017年4月24日；保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號。