[發明專利]一種檢測奧希替尼含量和有關物質的高效液相法

有效

• 申請號: 201710347869.7
• 申請日: 2017-05-17
• 公開（公告）號: CN107192773B
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發明（設計）人: 彭學東;張梅;趙金召;祁法娟
• 申請（專利權）人: 張家港威勝生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 張建綱

本發明涉及一種藥物分析領域，具體涉及一種檢測奧希替尼含量和有關物質的高效液相色譜法。色譜條件是采用美國Agilent高效液相色譜儀，Agilent Eclipse Plus色譜柱C₁₈(250×4.6mm 5μm)，流動相以乙腈?磷酸緩沖液(6.8gKH₂PO₄溶解于1L水中，H₃PO₄調pH＝2.8)＝27:73，檢測波長為272nm，流速為1ml/min，進樣量為5μl。該檢測方法準確可靠、色譜峰分離效果好，能高效檢測奧希替尼含量和有關物質。

技術領域

本發明涉及一種檢測奧希替尼含量及有關物質的高效液相色譜法，屬于藥物分析領域。

技術背景

奧希替尼(結構式見附圖1)分子式：C₂₈H₃₃N₇O₂·CH₄O₃S，黃色結晶性粉末。用于治療EGFR T790M突變陽性的局部晚期或轉移性非小細胞肺癌的靶向藥物。它是一種口服的激酶抑制劑，用于既往經表皮生長因子受體(EGFR)酪氨酸激酶抑制劑(TKI)治療時或治療后出現的疾病進展，并且經檢測確認存在EGFR T790M突變陽性的局部晚期或轉移性非小細胞性肺癌(NSCLC)成人患者的治療，并有研究在肺癌腦轉移中具有顯著治療。在我國，每年新發病的肺癌患者超過73萬人，是發病率和死亡率最高的惡性腫瘤。目前關于檢測奧西替尼含量和有關物質方面沒有研究。就此本發明采用高效液相法檢測奧西替尼的含量和有關物質，以乙腈-磷酸緩沖液(6.8gKH₂PO₄溶解于1L水中，H₃PO₄調pH＝2.8)為流動相，等度洗脫。該檢測方法簡便高效，色譜峰分離度很好，分離度大于1.5，符合中國藥典2010版檢測標準，并且色譜峰無拖尾無前延現象，拖尾因子T＝1.12，符合中國藥典2010版規定拖尾因子0.95～1.05。所以該檢測方法在奧希替尼含量控制和雜質分析具有重要的應用價值。

發明內容

本發明經多次精密試驗提供一種更準確、高效的測定奧希替尼含量和有關物質的高效液相色譜法。為了達到目的，本發明用了如下技術方案:

本發明的一個具體實施例中，本發明采用Agilent高效液相色譜儀測定奧希替尼的含量和有關物質，以乙腈-磷酸緩沖液(6.8gKH₂PO₄溶解于1L水中，H₃PO₄調pH＝2.8)為流動相進行等度洗脫，并且經過多次實驗驗證，流動相比例優選27:73。

本發明又一個具體實施例中，本發明提供Agilent Eclipse Plus十八烷基鍵合硅膠色譜柱或者效能相當的色譜柱，經過多次實驗驗證，本發明優選Agilent Eclipse Plus色譜柱，其分析色譜峰形較好，無拖尾峰無前延峰。

本發明另一個具體實施例中，十八烷基鍵合硅膠色譜填料顆粒為3-5μm，優選5μm，色譜柱的長度為150mm或250mm，優選250mm。

本發明再一個具體實施例中，利用DAD檢測器進行190nm-400nm全波長掃描，結果奧希替尼在212nm、272nm、374nm處有最大吸收，且奧希替尼的有關物質在272nm波長下也有較好的吸收，因此優選272nm作為奧希替尼含量和有關物質測定的檢測波長。

本發明再一個具體實施例中，利用標準品溶液多次進樣來確定進樣量，進樣精密度次數為5次，所得最佳進樣量為5μl。

本發明還有一個具體實施例中，所述流動相的流速為0.5～1.2ml/min，優選1ml/min。

本發明提供一種HPLC法測定奧希替尼含量和有關物質的方法，其步驟如下：