[發明專利]P糖蛋白在影響INS-1 832/13細胞胰島素分泌應用

在審

• 申請號: 201710345704.6
• 申請日: 2017-05-16
• 公開（公告）號: CN108853477A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 李代清;朱楠楠;田琳琳
• 申請（專利權）人: 李代清
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61P3/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種P糖蛋白作為保護因子在影響INS?1 832/13細胞胰島素分泌中的應用。研究闡明了P糖蛋白對大鼠胰島素瘤細胞INS?1 832/13細胞胰島素分泌方面的作用機制。體外試驗發現，P糖蛋白可通過提高細胞內cAMP含量，進一步激活PKA信號轉導通路，增加PKA、CREB活性。同時，本實驗驗證了P糖蛋白與脂筏相關蛋白，小窩蛋白(Caveolinl)、L型鈣離子通道蛋白1.2(Cav1.2)、鉀離子通道蛋白(Kir6.2)、腺苷酸環化酶的存在相互作用，從而影響胰島素的分泌。本發明為研究胰島保護因子，提高胰島移植臨床轉歸提供理論基礎。

技術領域

本發明涉及一種生物工程領域，具體涉及一種能夠影響INS-1 832/13細胞胰島素分泌的P糖蛋白。

背景技術

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一類因胰島素抵抗和(或)胰島素分泌不足所引起的以慢性高血糖為特征的代謝紊亂性疾病，嚴重危害人類生命和生活質量。其病理生理學極其復雜，在全球范圍內廣為流行，且其發病率還會繼續增加。2014年，全球18歲以上的T2DM的發病率大約為9％。在美國，排除意外事故的影響，糖尿病是女性死亡的第五大原因，是男性死亡的第四大原因。而中國糖尿病的發病率為9.7％(9.24億成年人)，且前驅糖尿病的發病率為15.5％(14億成年人)。糖尿病發病率的增加與經濟快速發展，平均壽命延長以及生活方式改變有關。血糖控制不佳會增加糖尿病相關的微血管和大血管并發癥風險。糖尿病及并發癥使患者生活質量降低，壽限縮短，病死率增高，應及早防治。糖尿病治療在于改善血糖控制，以降低并發癥的發生。

很多研究表明糖尿病可以改變許多藥物在體內的藥代動力學作用，并且這種變化通常與外排轉運體的改變密切相關。有研究發現外排轉運體家族主要成員之一的ATP結合盒 (ATP-binding cassette)超家族蛋白與糖、脂肪、膽固醇的平衡密切相關。ATP結合盒超家族 (ATP-binding cassette super family，ABC)，在人類主要包括49個家庭成員，這些家庭成員依據序列的同源性主要分成了7個亞族ABCA，ABCB，ABCC，ABCD，ABCE，ABCF及ABCG。磺脲類受體(sulfonyureal receptor，SUR)是ABCC亞族的重要成員，主要包括SUR1(ABCC8)及SUR2(ABCC9)。SUR1通過對胰島細胞上重要的離子通道-ATP敏感性鉀離子通道(K_ATP) 的調控在胰島素分泌中發揮著重要的作用。ABC另一個重要成員，ABCA1，與糖脂代謝的相關報道近年來逐漸增多。有報道表明GSIS過程中的第一相分泌的失調控與脂質毒性相關，而后者與ABCA1有著非常緊密的關系。另有報道證明在ABCA1敲除小鼠的實驗中ABCA1 通過調控體內膽固醇的平衡而改善胰島β細胞功能，維持良好的胰島素分泌及糖耐。ABCG1 與ABCA1相似，通過調控膽固醇而對胰島素分泌產生調節作用。

P-糖蛋白(ABCB1B)作為ABC轉運蛋白超家族中的一員，是一個分子量約為170Kda的大分子跨膜蛋白，在人類由abcb1b單基因調控，在嚙齒類動物中由abcb1a和abcb1b雙基因調控，代謝產物分別為MDR1和MDR3。P-糖蛋白高表達于惡性腫瘤組織中，并且與化療藥物耐藥密切相關，因此得名為多藥耐藥(MDR)蛋白。它具有廣泛結構類型的底物，作為藥物的外排泵，通過水解ATP酶產生的能量，外排大量疏水性藥物，如抗癌藥物，環孢素A、鈣通道阻滯劑，黃連素等。P-糖蛋白不僅存在于腫瘤細胞中，也廣泛分布于正常組織中，如腦、腸、肺、肝、腎、皮膚等，尤其是具有有排泄和分泌作用的內皮細胞表面，表明該蛋白與細胞分泌激素類物質及防止毒素入侵有關。