[發明專利]一種利用酶標記核酸適配體檢測黃曲霉毒素B1的方法有效
| 申請號： | 201710339460.0 | 申請日： | 2017-05-15 |
| 公開（公告）號： | CN107192816B | 公開（公告）日： | 2021-07-16 |
| 發明（設計）人： | 趙強;孫琳琳 | 申請（專利權）人： | 中國科學院生態環境研究中心 |
| 主分類號： | C12N15/115 | 分類號： | C12N15/115;G01N33/535;G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;何葉喧 |
| 地址： | 100085 北京市海淀區*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 標記 核酸 體檢 黃曲霉 毒素 b1 方法 | ||
1.一種檢測黃曲霉毒素B1的方法，依次包括如下步驟：
（1）取具有包被的微孔板，加入待測樣本和特異探針，室溫靜置孵育30分鐘，然后洗滌；
（2）通過檢測特異探針相應的信號實現對黃曲霉毒素B1的檢測；
所述具有包被的微孔板為如下（a）或（b）：
（a）包被有黃曲霉毒素B1-BSA偶聯物的微孔板；
（b）包被有黃曲霉毒素B1和載體蛋白的偶聯物的微孔板；
所述特異探針為特異探針甲；所述特異探針甲為元件甲和元件乙的結合物；所述元件甲為在與黃曲霉毒素B1特異結合的核酸適配體的末端借助三甘醇作為連接臂連接生物素得到的物質；所述元件乙為辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素；
所述與黃曲霉毒素B1特異結合的核酸適配體如序列表的序列1所示；
所述微孔板為非透明微孔板；所述步驟（2）的實現方式為：加入化學發光底物溶液，室溫靜置孵育5分鐘后測定化學發光強度。
2.一種用于檢測黃曲霉毒素B1的試劑盒，包括特異探針、具有包被的微孔板和化學發光底物溶液；
所述特異探針為特異探針甲；所述特異探針甲為元件甲和元件乙的結合物；所述元件甲為在與黃曲霉毒素B1特異結合的核酸適配體的末端借助三甘醇作為連接臂連接生物素得到的物質；所述元件乙為辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素；
所述具有包被的微孔板為如下（a）或（b）：
（a）包被有黃曲霉毒素B1-BSA偶聯物的微孔板；
（b）包被有黃曲霉毒素B1和載體蛋白的偶聯物的微孔板，
所述與黃曲霉毒素B1特異結合的核酸適配體如序列表的序列1所示。
3.權利要求2所述試劑盒在檢測黃曲霉毒素B1中的應用。
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