[發明專利]一種富鐵酵母產品及其生產方法

在審

• 申請號: 201710338745.2
• 申請日: 2017-05-15
• 公開（公告）號: CN107236677A
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 馮杰;丁成;李海云
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/36;A23K10/18;A23K50/30;C12R1/865
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司33200
• 代理人: 鄭海峰

技術領域

本發明屬于飼料添加劑技術領域，具體涉及一種用于動物飼料的富鐵酵母產品及其生產方法。

背景技術

鐵是動物機體所必需的微量元素，它參與多種細胞酶的構成，是合成血紅蛋白、肌紅蛋白，轉運營養成分和氧的重要物質，對機體的免疫機能也起到一定的促進作用。豬機體中的鐵主要有三個生理功能：生理防御、預防機體感染疾病；參與體內物質代謝；參與載體的組成、轉運和儲存營養。豬補鐵還可促進仔豬長，改善仔豬皮毛光亮度。目前動物飼養補充鐵的主要途徑是在飼料中額外添加所需的鐵，大部分以無機鐵為主。無機鐵吸收利用率較低，在飼料中添加過量的鐵，不僅增加了生產成本而且還會增加糞便中鐵的沉積，給生態環境造成環境污染。在畜禽養殖生產中，鐵等微量元素的排放已逐漸成為困擾農業可持續發展的亟待解決的問題之一。

目前，國內大多采用高劑量硫酸亞鐵、三氧化鐵等無機鐵作為鐵營養添加劑，但無機鐵生物效價低、添加量大、易造成了嚴重的環境污染；而穩定性好、生物學效價較高的有機鐵(如氨基酸螯合鐵、蘇氨酸螯合鐵等)由于其生產工藝復雜、價格較高限制其應用。而富鐵酵母不僅可以滿足動物機體對于鐵的需要，而且酵母中有很豐富的營養成分，可以發揮協同作用。

發明內容

本發明的目的是提供一種富鐵酵母產品及其生產方法，為動物提供安全、高效的補鐵劑。

為達到上述目的，發明人必需解決兩個關鍵性的問題，一是制備耐高鐵的酵母菌種；二是高鐵含量富鐵酵母的生產工藝。

本發明富鐵酵母產品的生產方法包括如下步驟：

1)制備耐高鐵的酵母菌種

1.1)啤酒酵母菌種接種到含鐵的麥芽糖培養基中培養，篩選出抗鐵能力強的菌種，作為誘變菌種；

1.2)將抗鐵能力強的酵母菌種接種到誘變培養基上進行誘變培養20～45h；

1.3)將誘變后的菌株進行分離篩選，接種到含鐵的麥芽糖培養基中培養，篩選出抗鐵能力強的菌種，即為耐高鐵富鐵酵母菌種；

2)高鐵含量富鐵酵母的生產工藝

2.1)斜面菌種培養：耐高鐵富鐵酵母菌種接種于糖含量5～20％，含鐵量30～1000μg/ml，pH值4.0～7.0的麥芽汁固體培養基上，培養溫度25～36℃，培養25～50h，得到斜面酵母菌種；

2.2)一級液體種子培養：將斜面酵母菌種稀釋至菌株數496萬/ml，取2ml稀釋液接種于裝有250ml糖含量5～20％，含鐵量30～1000μg/ml，pH值4.0～7.0的麥芽汁培養基的三角瓶中，培養溫度25～36℃，培養25～50h，得到一級液體種子培養液；

2.3)二級液體種子培養：將100ml一級液體種子培養液接種于裝有50～100L糖含量5～20％，含鐵量30～1000μg/ml，pH值4.0～7.0的麥芽汁培養基的發酵罐中，培養溫度25～36℃，培養25～50h，得到二級液體種子培養液；

2.4)發酵罐培養：將1000ml二級液體種子培養液接種于裝有1000～2000L糖含量5～20％，含鐵量30～1000μg/ml，pH值4.0～7.0的麥芽汁培養基的發酵罐中，培養溫度25～36℃，培養25～50h，得到富鐵酵母培養液；

2.5)分離干燥：分離機分離，60～90℃烘干；

2.6)粉碎：粉碎機粉碎后既得到富鐵酵母產品，鐵含量為每千克酵母1000～6000毫克。

所述的步驟1.1)和步驟1.3)中的含鐵的麥芽糖培養基的總糖含量5～20％，含鐵量30～1000μg/ml，pH值4.0～7.0，培養溫度25～36℃，培養25～50h。

所述的步驟1.3)中的含鐵的麥芽糖培養基的含鐵量高于步驟1.1)中的含鐵的麥芽糖培養基。

所述的步驟1.2)中的誘變培養基中的誘變劑為N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍，濃度1.8～3.2mg/mL，總糖含量5～20％，pH值4.0～7.0。

所述含鐵的麥芽糖培養基所含鐵為無機鐵，所述的無機鐵包括氧化鐵、硫酸亞鐵；所述麥芽糖培養基和誘變培養基的氮源為尿素、硝酸銨、硫酸銨和磷酸氫氨中的一種或幾種；所述麥芽糖培養基和誘變培養基的磷源為植酸鈣、磷酸氫氨、磷酸氫二氨、磷酸氫二鉀中的一種或幾種。

所述的篩選出抗鐵能力強的菌種的方法為本領域的常規手段，可以采用如下方法：分別配置不同鐵濃度的的麥芽糖培養基，將啤酒酵母菌種或誘變后的菌種分別接種到不同鐵濃度的的麥芽糖培養基中培養；培養后選定菌種部分存活的含鐵溶度最高的麥芽糖培養基；該麥芽糖培養基中存活菌種作為抗鐵能力強的酵母菌種，作為誘變菌種。