[發明專利]氧化性修飾改善細胞穿透性勝肽的成藥性以作為藥物載體

有效

• 申請號: 201710335258.0
• 申請日: 2017-05-12
• 公開（公告）號: CN107955074B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發明（設計）人: 林育民;陳韋岑;蔣文欽;張定蓮;郭俊宏
• 申請（專利權）人: 傑安生技股份有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K47/62
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 史霞

本發明提供一種經由氧化性修飾所得的細胞穿透性勝肽二聚體，藉由雙硫鍵將兩單體連接而成。本發明的有益效果是，該二聚體可通過增強勝肽載體的穩定性、降低其被酵素水解的速率、保持細胞穿透能力及增加硫酸乙酰肝素的結合專一性與結合力來增加勝肽的成藥性。此經修飾的勝肽可作為適合的藥物載體來傳遞藥物，以應用于標靶治療。

技術領域

本發明系關于一種經氧化修飾所產生的細胞穿透性勝肽二聚體，特別是關于一種通過雙硫鍵連接的細胞穿透性勝肽二聚體。此二聚體改善原有的細胞穿透性勝肽的特性，尤其是應用于藥物載體時所產生的藥物安定性問題，所導致的成藥性障礙。

背景技術

目前在癌癥治療的化學療法中，常產生嚴重的不良副作用，乃是因藥物對癌細胞和正常細胞不具辨識度，無選擇性的攻擊，因而導致藥物療效區間(therapeutic window)范圍狹小，更損及臨床預后結果(prognosis)。為了降低對正常組織的危害，用于抗癌的化學治療常常給予未達標準的治療劑量，導致治療效果不全然達到預期的效果。為了克服這些挑戰，標靶藥物傳遞系統應運而生，藉由專一性的特定細胞結合能力，藥物功效得以改善并降低副作用。時至今日，研究顯示，除單株抗體外，勝肽、蛋白質及小分子皆有可能作為載體，與藥物結合形成載體-藥物復合物，能選擇性地將藥物帶至特定受體異常表現的癌細胞。然而，截至目前為止，尚未有任何利用勝肽所形成的載體-藥物復合物成功地上市。這可能歸咎于許多原因，包含(a) 發現能匹配特定細胞表面標靶受體(targeted receptor)的適當配體(ligand)的工程巨大；(b)缺乏配體被細胞吸收與胞內排除等機轉的相關研究信息；及(c)關于此類復合物的物理、化學性質與傳輸特性等系統性研究十分有限。

近期，有一種新型態細胞穿透性勝肽(CPP)的發現，已針對上述諸多問題，貢獻可能的解決方案。此種勝肽CPP_ecp，衍生自人類嗜酸性陽離子蛋白質的特定氨基酸序列[ECP(32-41)]。之前已被證明位于CPP_ecp的特定內部結構區域(motif)具有肝素或硫酸乙酰肝素的結合能力，且CPP_ecp同時展現低細胞毒性與適度的癌細胞轉移抑制性，并通過巨胞飲作用(macropinocytosis)而達到其優越的細胞穿透性功效。這些功能特性也同步宣告CPP_ecp可能作為治療用的藥物載體。

然而，一般而言，自然存在的勝肽在循環血清中通常具有相對較短的半衰期，低穿透性及代謝不穩定性，導致其在組織中的滯留時間是有限且短暫的。即使CPP_ecp被證明具有高度的穿透性，考慮藥物吸收、分布、代謝和排泄(ADME)等諸多議題，低半衰期仍是使其成為成功的藥物載體的巨大挑戰。在本發明中，透過加強勝肽載體的穩定性、降低其被酵素水解的速率、保持穿透性及增加其對于硫酸乙酰肝素的選擇性結合活性，發展出改善勝肽成藥性的策略。

在上述發明背景說明段落中所揭露的內容，僅為增進對本發明的背景技術的了解，因此，上述的內容含有不構成阻礙本發明的先前技術，且應為本領域習知技藝者所熟知。

發明內容

本發明提供一種用于改善細胞穿透性勝肽的勝肽成藥性的概念，此細胞穿透性勝肽稱為CPP_ecp，其具有后述的序列：NYBX₁BX₂BNQX₃，其中B代表堿性氨基酸，X₁代表帶有芳香基、疏水性或不帶電的側鏈的氨基酸，X₂代表半胱氨酸（Cysteine），及X₃代表天門冬酰胺（Asparagine）或不存在。

本發明更提供一種氧化性修飾的策略，通過加強勝肽穩定性、降低其被酵素水解的速率、保持穿透性及增加其對于硫酸乙酰肝素的選擇性結合活性，進而改善勝肽應用于藥物載體的成藥性。