[發明專利]一種海南龍血樹查爾酮異構酶DcCHIL1及其編碼基因和應用有效
| 申請號： | 201710334743.6 | 申請日： | 2017-05-12 |
| 公開（公告）號： | CN107190016B | 公開（公告）日： | 2019-10-18 |
| 發明（設計）人： | 朱家紅;趙婉;梅文莉;戴好富;彭世清;王輝 | 申請（專利權）人： | 中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所 |
| 主分類號： | C12N15/61 | 分類號： | C12N15/61;C12N9/90;C12N15/10;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知識產權代理有限公司 11577 | 代理人： | 呂學文;朱紅濤 |
| 地址： | 571101 *** | 國省代碼： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 海南 龍血樹查爾酮異構酶 dcchil1 及其 編碼 基因 應用 | ||
1.一種海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1，其特征在于，該基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
2.一種海南龍血樹查爾酮異構酶DcCHIL1，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.權利要求1所述的海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1的克隆方法，其特征在于，包含如下步驟：
(1)設計特異引物P1正向引物和P2反向引物；
(2)以海南龍血樹莖干第一鏈cDNA為模板對DcCHIL1基因的CDS序列進行PCR擴增；
(3)將擴增獲得的PCR產物連接pMD18-T載體，轉化大腸桿菌感受態細胞，篩選陽性克隆并測序。
4.根據權利要求3所述的克隆方法，其特征在于，步驟(1)中所述的P1正向引物的序列如SEQ ID NO:3所示，所述P2反向引物的序列如SEQ ID NO:4所示。
5.根據權利要求3所述的克隆方法，其特征在于，步驟(2)中所述的PCR擴增 條件為：94℃預變性5min；94℃變性30sec，55℃退火30sec，70℃延伸1min，共35個循環；70℃延伸8min。
6.一種重組表達載體或表達盒，其特征在于，所述重組表達載體或表達盒含有如權利要求1所述的海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1。
7.一種轉基因細胞系或重組菌，其特征在于，所述轉基因細胞系或重組菌含有如權利要求1所述的海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1。
8.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有如權利要求1所述的海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1。
9.權利要求1所述的海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1的應用，其特征在于，將該基因應用于真核或原核表達。
10.權利要求1所述的海南龍血樹查爾酮異構酶基因DcCHIL1的應用，其特征在于，將該基因通過轉基因技術用于提高海南龍血樹類黃酮積累和血竭的產量。
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