[發(fā)明專利]垂絲海棠花多糖、提取方法及其在制備促凝血藥物方面的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710333531.6
• 申請(qǐng)日: 2017-05-12
• 公開（公告）號(hào): CN107033254B
• 公開（公告）日: 2019-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 康文藝;余琦;辛昕;呼謐允;王鵬禹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61K31/715;A61P7/04
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時(shí)立新;楊海霞

1.垂絲海棠花多糖在制備促凝血藥物方面的應(yīng)用，其特征在于，所述垂絲海棠花多糖經(jīng)下述步驟制備獲得：

1）制備粗多糖：將垂絲海棠花粉碎，在常溫條件下依次用石油醚、70±5%乙醇進(jìn)行浸提，浸提結(jié)束后過(guò)濾，烘干殘?jiān)缓笥谜麴s水于90±5℃進(jìn)行提取，提取結(jié)束后趁熱抽濾，濾液減壓濃縮獲得濃縮液，然后向濃縮液中加入乙醇使終濃度為70±2%，靜置，離心得一次沉淀，一次沉淀干燥后用蒸餾水溶解，采用Sevag法脫除蛋白，將得到的上清液減壓濃縮后再次加入乙醇并使終濃度為70±2%，靜置，離心得二次沉淀，干燥，加入蒸餾水溶解后，透析，透析結(jié)束后冷凍干燥即得粗多糖；

2）將粗多糖用蒸餾水溶解，0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，上樣到DEAE-52色譜柱，依次用蒸餾水、0.1 mol/L氯化鈉溶液和0.2 mol/L氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫，洗脫液采用苯酚-硫酸法進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)490 nm處的吸光度，以洗脫管數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制洗脫曲線，合并同一洗脫峰的多糖樣品，減壓濃縮，透析，冷凍干燥；其中，蒸餾水的洗脫峰為組分1，0.1 mol/L氯化鈉溶液的洗脫峰為組分2，0.2 mol/L氯化鈉溶液的洗脫峰為組分3；

3）組分1用蒸餾水溶解，0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾，上樣到Sephadex G-100色譜柱，用蒸餾水進(jìn)行洗脫，采用苯酚-硫酸法進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)其在490 nm處的吸光度，以洗脫管數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制洗脫曲線，得到單一洗脫峰，減壓濃縮、冷凍干燥后得到的多糖組分命名為MHP-W；

4）組分2和3均采用步驟3）同樣的方法進(jìn)行洗脫，得到單一洗脫峰，減壓濃縮、冷凍干燥后得到的多糖組分分別命名為MHP-1和MHP-2；

垂絲海棠花多糖即為MHP-W、MHP-1和MHP-2中的一種或兩種以上的混合物。

2.垂絲海棠花多糖在制備止血藥方面的應(yīng)用，其特征在于，所述垂絲海棠花多糖經(jīng)下述步驟制備獲得：

1）制備粗多糖：將垂絲海棠花粉碎，在常溫條件下依次用石油醚、70±5%乙醇進(jìn)行浸提，浸提結(jié)束后過(guò)濾，烘干殘?jiān)缓笥谜麴s水于90±5℃進(jìn)行提取，提取結(jié)束后趁熱抽濾，濾液減壓濃縮獲得濃縮液，然后向濃縮液中加入乙醇使終濃度為70±2%，靜置，離心得一次沉淀，一次沉淀干燥后用蒸餾水溶解，采用Sevag法脫除蛋白，將得到的上清液減壓濃縮后再次加入乙醇并使終濃度為70±2%，靜置，離心得二次沉淀，干燥，加入蒸餾水溶解后，透析，透析結(jié)束后冷凍干燥即得粗多糖；

2）將粗多糖用蒸餾水溶解，0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，上樣到DEAE-52色譜柱，依次用蒸餾水、0.1 mol/L氯化鈉溶液和0.2 mol/L氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫，洗脫液采用苯酚-硫酸法進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)490 nm處的吸光度，以洗脫管數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制洗脫曲線，合并同一洗脫峰的多糖樣品，減壓濃縮，透析，冷凍干燥；其中，蒸餾水的洗脫峰為組分1，0.1 mol/L氯化鈉溶液的洗脫峰為組分2，0.2 mol/L氯化鈉溶液的洗脫峰為組分3；

3）組分1用蒸餾水溶解，0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾，上樣到Sephadex G-100色譜柱，用蒸餾水進(jìn)行洗脫，采用苯酚-硫酸法進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)其在490 nm處的吸光度，以洗脫管數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制洗脫曲線，得到單一洗脫峰，減壓濃縮、冷凍干燥后得到的多糖組分命名為MHP-W；

4）組分2和3均采用步驟3）同樣的方法進(jìn)行洗脫，得到單一洗脫峰，減壓濃縮、冷凍干燥后得到的多糖組分分別命名為MHP-1和MHP-2；

垂絲海棠花多糖即為MHP-W、MHP-1和MHP-2中的一種或兩種以上的混合物。