[發明專利]一種呋喃西林生物標識物5-硝基-2-糠醛的氣相色譜質譜檢測方法

有效

• 申請號: 201710327126.3
• 申請日: 2017-05-10
• 公開（公告）號: CN107085056B
• 公開（公告）日: 2019-09-03
• 發明（設計）人: 張帥;張小軍;梅光明;嚴忠雍;方益;陳思;李佩佩;龍舉
• 申請（專利權）人: 浙江省海洋水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏;趙越劍

1.一種呋喃西林生物標識物5-硝基-2-糠醛的氣相色譜質譜檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)待檢測液制備

稱取1.0±0.1g的樣品，放入50毫升的樣品管內，加入2毫升高氯酸，充分渦旋后，避光放置于40℃的水浴中氧化反應20分鐘，加入100μL甲醇，5毫升濃硫酸，充分渦旋后，避光放置于60℃的水浴中酯化反應20分鐘后，冷卻至室溫，加入2毫升正己烷，充分渦旋后，6000轉/min離心五分鐘，取1.0毫升上清液用0.2μm的濾膜過濾，得待檢測液供氣相色譜串聯質譜儀分析；

(2)GC-MS分析

待檢測液經氣相色譜串聯質譜儀檢測分析，外標法定量；其中，氣相色譜檢測條件為：色譜柱：DB-5MS彈性石英毛細管柱，規格：30m*0.25mm*0.25μm；載氣為純度大于99.99％的高純氦氣，流量1.0ml/min；柱溫為80℃保持1min，以20℃/min升至250℃，保持10min；進樣口溫度為220℃；不分流進樣模式，進樣量1.0μL。

2.根據權利要求1所述的氣相色譜質譜檢測方法，其特征在于，所述高氯酸的濃度為12moL/L。

3.根據權利要求1所述的氣相色譜質譜檢測方法，其特征在于，所述硫酸濃度為18.4mol/L。

4.根據權利要求1所述的氣相色譜質譜檢測方法，其特征在于，質譜檢測條件為：離子源溫度230℃，電子轟擊能量70eV，接口溫度260℃，四級桿溫度150℃，質譜掃描方式為全掃描模式和選擇離子檢測模式：質量掃描范圍m/z50-450，選擇監測質量數m/z為113.0，171.0，溶劑延遲3min。

5.根據權利要求1所述的氣相色譜質譜檢測方法，其特征在于，外標法定量，采用5-硝基-2-糠酸甲酯作為標準品，繪制標準曲線時5-硝基-2-糠酸甲酯標準工作溶液的濃度設置為1.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL。

6.根據權利要求5所述的氣相色譜質譜檢測方法，其特征在于，5-硝基-2-糠酸甲酯標準工作溶液由外標儲備液稀釋而得，外標儲備液的制備方法為：將10毫克5-硝基-2-糠酸甲酯溶解在10毫升正己烷中，用移液器取10微升上述溶液，然后用正己烷定容至10毫升的容量瓶里，制得濃度為1.0mg/L的外標儲備液。