[發明專利]一種利用微生物發酵核桃隔制備的煙用香料及其應用

在審

• 申請號: 201710326183.X
• 申請日: 2017-05-10
• 公開（公告）號: CN107354174A
• 公開（公告）日: 2017-11-17
• 發明（設計）人: 黨立志;陳興;段焰青;劉秀明;楊曉艷;李利君;蔣舉興
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12P1/04
• 分類號: C12P1/04;C12N1/20;A24B3/12;C12R1/01
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙)53108
• 代理人: 謝嘉

技術領域

本發明屬于微生物應用及煙用香料制備技術領域，具體是涉及一種利用微生物新種——洞穴動球菌與特色植物原料——核桃隔共同發酵制備得到的煙用香料。同時，本發明還涉及所述的煙用香料在卷煙生產中的應用。

背景技術

微生物種類豐富，長期以來，人們利用純培養技術對環境中的微生物進行調查研究和開發利用。隨著科學技術的發展，微生物資源在科技研究及生物產業中的重要性日益凸顯。世界上許多國家都在搜集、保存各種微生物資源，其不斷豐富將為生物技術的發展奠定堅實的物質基礎。

加香加料是卷煙工藝中的關鍵環節，是有效提升卷煙抽吸品質，形成卷煙特有風格的有效手段之一。目前我國煙草中添加的煙用香料大多是采用傳統方法萃取再加以調配所得，雖然生產操作簡單，但也存在香氣單調、改善卷煙抽吸效果不明顯等缺點。利用微生物對香原料進行發酵，可以增加傳統提取香料中多種香氣物質的含量，提升香氣豐富性。而現有工業產香微生物存在種類固化，發酵香料類型有限等問題，迫切需要尋找并篩選新的能夠發酵產生特殊香氣的微生物菌株，以拓展煙用香料的豐富性，滿足卷煙生產需求。

國內外煙草工作者在利用微生物發酵生產煙用香料方面已經做了很多工作，但多限于產香酵母。本發明提供的洞穴動球菌為首次被分離得到，經鑒定為微生物新種，目前未有任何關于所述洞穴動球菌及相關應用的公開報道。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種利用微生物發酵核桃隔制備得到的煙用香料。

本發明的目的還在于提供所述的煙用香料在卷煙生產中的具體應用。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現。

除非另有說明，本發明所采用的百分數均為質量百分數。

一種利用微生物發酵核桃隔制備的煙用香料：以核桃隔為原料，用洞穴動球菌(Kineococcus cavernae sp).SYSUZL-1進行發酵，再由發酵液中提取致香成分即得產品；所述的洞穴動球菌SYSUZL-1，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏日期2016年12月9日,保藏編號CCTCC M2016738。

所述的洞穴動球菌(Kineococcus cavernae sp)SYSUZL-1，于煙田相鄰近的喀斯特洞穴土壤中分離得到，可在含有簡單碳氮源的培養基上產生揮發性特殊香味氣息。經過微生物學特性分析和16S rRNA基因序列分析表明該菌株是一種新的細菌。該菌株能夠產生苯甲醛及土味素、欖香烯、欖香醇、a-桉葉醇等幾類主要揮發性化合物。其中，苯甲醛具有香味氣息，微生物中較常見，但產量不高；土味素為放線菌產生的常見化合物，本身有腥味。欖香烯具有抑制癌細胞的作用，是目前一類上市抗癌藥中的主要成分，具有較高經濟價值，特別是微生物自主代謝產生。欖香醇常用作香精原料。桉葉醇本身具有一定香味，且可做定香劑來使用。利用該菌株發酵，能夠得到特殊香氣的煙用香料，此外，該菌株還具有開發新型、高效、無毒天然藥物的巨大潛力。

核桃隔(又名核桃隔心木，分心木)，具有利尿清熱、健脾固腎等功效。其與洞穴動球菌SYSUZL-1共同發酵的產物具有特殊酸香，能夠增加卷煙香氣豐富性，減少喉部刺激。

所述的利用微生物發酵核桃隔制備的煙用香料，具體通過以下方法得到：

(1)斜面培養：接種洞穴動球菌SYSUZL-1于斜面培養基中，培養溫度28℃，培養時間7d；所述的斜面培養基為：葡萄糖0.5g，酵母膏0.5g，蛋白胨0.5g，酸水解酪蛋白0.5g，可溶性淀粉0.5g，丙酮酸鈉0.3g，磷酸氫二鉀0.3g，硫酸鎂0.05g，瓊脂15g和蒸餾水1000ml，調pH值7.2；

(2)種子培養：從斜面挑取菌絲體接入種子培養基中，搖瓶培養36小時，培養溫度28℃，得活化菌液；所述的種子培養基為：糊精120g，大豆粉40g，酵母膏2g，色氨酸0.5g，β-丙氨酸5g，硫酸鎂0.5g，磷酸銨0.2g和蒸餾水1000ml，調pH值7.2；

(3)發酵：將核桃隔粉碎后加入兩倍重量的水，混合均勻，按核桃隔重量的5％～20％接種洞穴動球菌活化菌液，振蕩培養進行發酵，發酵溫度30℃，發酵時間24～48h；

(4)香料提取：取步驟(3)所得發酵液回流提取3h，過濾除渣，取上清液，50℃減壓濃縮成浸膏，即得所需煙用香料。

所述的煙用香料在卷煙生產中的應用，具體為：將所得煙用香料稀釋后均勻地噴灑在煙絲上，煙用香料的添加量為煙絲重量的0.2％～0.6％。

相對于現有技術，本發明具有以下優點：