[發明專利]黑桑植物提取物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710325934.6
• 申請日: 2017-05-10
• 公開（公告）號: CN108853198A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 胡曉;徐良金;牛莉鑫;黃春躍;王伊凡
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: A61K36/605
• 分類號: A61K36/605;A61P35/00;A61Q19/02
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;余化鵬

本發明公開了一種黑桑植物提取物及其制備方法和應用。該制備方法包括如下步驟：(1)將新疆藥桑為原料用體積百分比濃度為≥30％的乙醇水溶液或乙醇提取，之后將提取液合并、過濾、減壓濃縮，至提取液無醇味后將乙醇提取物烘干得浸膏；(2)將步驟(1)中得到的浸膏用純水分散，然后加入低極性溶劑萃取除雜，之后將水層用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，濃縮干燥，即得活性酪氨酸酶抑制部位。本發明的制備方法生藥得率高、成本低，易實現產業化。本發明得到的活性部位具有顯著的酪氨酸酶抑制活性，可用于制備預防和治療因酪氨酸酶過度表達而引起的癥狀和疾病的制劑和藥物，以預防和治療果蔬褐變、皮膚色素沉著及黑色素瘤。

技術領域

本發明涉及一種黑桑植物提取物及其制備方法和應用。

背景技術

酪氨酸酶(Tyrosinase)是一種含銅的金屬酶，廣泛存在于微生物、動植物和人體中，是生物體中黑色素生成的關鍵酶和限速酶。黑色素的過量生成會導致人體雀斑、褐斑等色素沉著性疾病，與黑色素瘤的發生發展也有一定關系；在食品領域，黑色素的生成能導致果蔬、生鮮的黑變和褐變。因此，酪氨酸酶抑制劑廣泛應用于果蔬保鮮、人體皮膚美白，以及色素沉著疾病的治療等領域，而植物來源的酪氨酸酶抑制劑具天然、安全、高效等特點，是目前重要的開發方向。

新疆藥桑，學名黑桑(Morus nigra L.)，系桑科(Moraceae)桑屬(Morus L.)植物，原生長于亞洲西部伊朗，我國主要在新疆吐魯番，喀什以南的地區有廣泛栽培，其果實，葉子以及枝條都具有很好的藥用價值和食用價值，在新疆當地被稱為藥桑。新疆藥桑是目前國內唯一的22倍體桑種，其特異的染色體倍數和特殊的生態環境帶導致其次生代謝產物有別于其他桑種。已有文獻報道通過系列層析技術，從黑桑中分離得到的部分酚性單體化合物具酪氨酸酶抑制活性(Zhang X.，etc.Biol Pharm Bull，2009，32(1)：86-90；王賀瑤等CN200710 171483.1；王賀瑤等CN200710171484.6)，但工藝復雜，且單體化合物得率很低(生藥得率均低于0.01％)，不易實現工業化。因此，這一問題亟待解決。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術中的黑桑中分離得到的具酪氨酸酶抑制活性的物質為部分酚性單體化合物，提取工藝復雜、單體化合物獲得率很低等缺陷，提供了一種黑桑植物提取物及其制備方法和應用。本發明的黑桑植物提取物的制備工藝簡單合理，成本低，產率高(較文獻中單體化合物得率提高至少100倍)易實現產業化；且該提取物具有多成分組成、多成分協同作用的特點，活性較主要單體化合物顯著提高，可用于制備預防和治療因酪氨酸酶過度表達而引起的癥狀和疾病的制劑和藥物，包括但不限于預防和治療果蔬褐變，皮膚色素沉著疾病及黑色素瘤的食品添加劑、化妝品和藥品的用途。

本發明提供了一種黑桑植物提取物的制備方法，其包括如下步驟：

(1)將新疆藥桑為原料用體積百分比濃度為≥30％的乙醇水溶液或乙醇提取，之后將提取液合并、過濾、減壓濃縮，至提取液無醇味后將乙醇提取物烘干得浸膏；

(2)將步驟(1)中得到的浸膏用純水分散，然后加入低極性溶劑萃取除雜，之后將水層用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，濃縮干燥，即得活性酪氨酸酶抑制部位。

步驟(1)中，所述原料本領域均知可為新疆藥桑的根、莖、葉、皮和果實中的一種或多種，較佳地為新疆藥桑的莖枝。

步驟(1)中，所述新疆藥桑作為原料，一般來講本領域技術人員均知使用的原料為晾干粉碎后的原料。晾干后，所述原料的含水量質量百分比一般不高于6％。

步驟(1)中，所述乙醇水溶液的體積百分比濃度較佳地為60％。

步驟(1)中，所述提取的操作和條件為本領域常規的提取的操作和條件，所述提取較佳地進行1～3次，更佳地為2次；所述提取的時間較佳地為每次1～2小時，更佳地為1.5小時；所述提取使用的所述乙醇水溶液的體積與所述新疆藥桑原料的質量的比為8～15，較佳地為10。