[發明專利]一種基于3型肺炎鏈球菌莢膜多糖的寡糖綴合物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201710323724.3
• 申請日: 2017-05-10
• 公開（公告）號: CN107224577B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 顧國鋒;熊成鶴;郭忠武;馮少杰;喬銀
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K39/09
• 分類號: A61K39/09;A61K39/385;A61P31/04;A61P11/00
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 朱家富

本發明涉及一種基于肺炎鏈球菌3型莢膜多糖的寡糖綴合物及其制備方法與應用。一種肺炎鏈球菌3型莢膜多糖相關寡糖綴合物，結構通式如下所示：本發明首次公開了肺炎鏈球菌3型莢膜多糖相關寡糖衍生物的合成，肺炎鏈球菌3型莢膜多糖相關寡糖衍生物可用來制備針對3型肺炎鏈球菌的新型寡糖?蛋白結合疫苗。

技術領域

本發明涉及一種基于肺炎鏈球菌3型莢膜多糖的寡糖綴合物及其制備方法與應用，屬于肺炎鏈球菌疫苗研制技術領域。

背景技術

肺炎鏈球菌是一種革蘭氏陽性雙球菌，在1881年同時由美國陸軍醫生GeorgeSternberg和法國化學家Louis Pasteur首次分離得到。它常寄居在人的鼻咽腔中，可造成呼吸道感染和肺部感染，嚴重時可引起腦膜炎、中耳炎、敗血癥等疾病。在發展中國家每年將近有100萬的5歲以下兒童死于這些疾病，預防和救治這些傳染性疾病需要花費大量的財力。

肺炎鏈球菌的表面有一層厚厚的糖衣，可以減小外界的影響和在一定程度上抵抗非特異性的人體免疫，該糖衣就是肺炎鏈球菌的莢膜多糖。研究表明，莢膜多糖是其致病的重要獨立因子因素。根據莢膜多糖的結構不同，人們將肺炎鏈球菌分成多個亞型，如3型、6A型、6B型、23F型等等。截至目前為止，人們已經發現96種亞型，但是并不是所有的亞型都常見或有致病性，常見的致病亞型有3型、5型、19F型、6B型、23F型等。

長久以來，人們將抗生素作為抗肺炎鏈球菌感染的首選藥物。隨著對抗生素和其它抗菌藥物產生耐藥性的菌株的出現，臨床上治療肺炎鏈球菌感染面臨很大的困難。因此，肺炎鏈球菌疫苗的研制一直是國際上關注的熱點方向。肺炎鏈球菌疫苗主要有莢膜多糖疫苗、莢膜多糖-蛋白結合疫苗。但肺炎鏈球菌莢膜多糖是不依賴于T細胞的抗原，對免疫系統發育不完善的5歲以下兒童和免疫系統能力下降的65歲以上的老人保護性弱，外加上兒童和老人又是侵襲性感染和粘膜感染的高發年齡組，所以人們將肺炎鏈球菌莢膜多糖與載體蛋白共價結合，使莢膜多糖抗原轉化成依賴T細胞的抗原，使兒童和老人在注射疫苗后產生良好的免疫應答，產生抗體清除致病細菌。因此，目前市場上主要以肺炎鏈球菌莢膜多糖-蛋白結合疫苗為主。

多價的肺炎鏈球菌莢膜多糖-蛋白結合疫苗的生產，首先是培養各個亞型的肺炎鏈球菌，培養成熟后通過破碎菌體來提取其莢膜多糖，得到各亞型莢膜多糖后將它們通過化學法鍵合到載體蛋白上制成糖蛋白結合疫苗。這類結合疫苗存在幾點不足之處：(1)通過破碎菌體得到的莢膜多糖非單一物質，其莢膜多糖糖鏈長短不一；(2)在提取莢膜多糖的過程中不可避免的會混入破碎的菌體碎片；(3)每個批次結合疫苗的效果可能不一樣，具有微觀不均一型，產品質量難以控制。

中國專利文獻CN105636611A(申請號201480051165.X)公開了不含蛋白質和肽的綴合物，包含合成的碳水化合物和載體分子，其中所述合成的碳水化合物是與肺炎鏈球菌3型莢膜多糖有關的碳水化合物而所述載體分子是鞘糖脂。所述綴合物及其藥物組合物可用于免疫與肺炎鏈球菌有關的疾病，和更特別地與肺炎鏈球菌3型有關的疾病。然而，由于載體分子是一類小分子化合物--鞘糖脂，導致其生物兼容性較差，免疫記憶持續時間較短；而目前未有采用免疫原性的生物大分子與肺炎鏈球菌細胞表面3型夾膜多糖的寡聚衍生物相連接的研究，比如白喉類毒素CRM197、破傷風類毒素(TT)以及單磷酰化的脂質A等。主要技術難題是肺炎鏈球菌細胞表面3型夾膜多糖的寡聚衍生物與不同的免疫原性的生物大分子相連后，對其生物活性的影響不可預知。

發明內容

本發明針對現有肺炎結合疫苗生產技術的不足，提供一種肺炎鏈球菌3型莢膜多糖相關寡糖綴合物及其制備方法與應用，其中的寡糖是肺炎鏈球菌細胞表面3型夾膜多糖的寡聚衍生物。

本發明通過如下的技術方案來實現：

一種肺炎鏈球菌3型莢膜多糖綴合物，結構通式如式(III)所示：

其中，寡糖選自如下式(I)或式(II)之一：