[發(fā)明專利]一種棉花耐低鉀種質(zhì)的鑒定方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710322947.8
• 申請(qǐng)日: 2017-05-09
• 公開（公告）號(hào): CN107219174A
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王寧;嚴(yán)根土;石建斌;許慶華;周紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;G01N33/00
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

1.一種棉花耐低鉀種質(zhì)的鑒定方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將棉花種子平分兩部分，分別進(jìn)行水培培養(yǎng)和蛭石培養(yǎng)各6天；選擇生長(zhǎng)整齊的幼苗，用刀片分別切取水培條件下幼苗中上部根系及蛭石培養(yǎng)條件下主根根系作為待測(cè)樣品；

同時(shí)，以耐低鉀材料中571和鉀敏感品種新棉99B分別作為耐低鉀對(duì)照樣品和鉀敏感對(duì)照樣品；

(2)將待測(cè)樣品及對(duì)照樣品分別先用去離子水沖洗干凈，浸沒于蒸餾水中，再浸入測(cè)試液中平衡；

(3)將步驟(2)處理好的待測(cè)樣品及對(duì)照樣品分別轉(zhuǎn)入新的測(cè)試液中，采用非損傷性微測(cè)技術(shù)分別測(cè)定低鉀脅迫水培培養(yǎng)6天和蛭石培養(yǎng)發(fā)苗6天的棉花幼苗的鉀離子流速；

(4)通過比較待測(cè)組織樣品與對(duì)照樣品的鉀離子流速，判斷所述棉花種子是否為耐低鉀性較強(qiáng)的棉花種質(zhì)材料。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定方法，其特征在于，步驟(1)中，水培及蛭石培養(yǎng)條件：在光照或鈉燈培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行，光照強(qiáng)度為450μmol m^-2s^-1，光照時(shí)間為14h，白天溫度為28±2℃，夜間溫度為20±2℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定方法，其特征在于，步驟(1)中，所述水培培養(yǎng)條件為：將種子均勻播于用去離子水沖洗過的沙床，上面蓋一層布后再覆薄沙一層，4d后將幼苗轉(zhuǎn)移至改良的Hoagland營(yíng)養(yǎng)液中進(jìn)行低鉀脅迫培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鑒定方法，其特征在于，所述改良的Hoagland營(yíng)養(yǎng)液配方為：2.5mM Ca(NO₃)₂,1mM MgSO₄,0.5mM (NH₄)H₂PO₄,0.1mM Fe-Na-EDTA,0.2μM CuSO₄,1μM ZnSO₄,20μM H₃BO₃,5pM(NH₄)₆Mo₇O₂₄,1μM MnSO₄和0.1mM KCl。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定方法，其特征在于，所述蛭石培養(yǎng)條件為：將種子播種于盛有去離子水洗過蛭石的容器中，每天噴水保持蛭石的濕度。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述的鑒定方法，其特征在于，所述測(cè)試液配方：0.1mmol L^-1KCl、0.1mmol L^-1CaCl₂、0.3mmol L^-1MES，pH 6.0。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述的鑒定方法，其特征在于，步驟(3)中，所述水培培養(yǎng)的測(cè)定部位為：距幼苗根尖300-600μm，優(yōu)選300μm處。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述的鑒定方法，其特征在于，步驟(3)中，所述蛭石培養(yǎng)的測(cè)定部位為：距幼苗根尖600-800μm，優(yōu)選600μm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一所述的鑒定方法，其特征在于，步驟(3)中，待測(cè)試環(huán)境達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后測(cè)試時(shí)間持續(xù)5～8min。