[發明專利]一種腸壁脫落細胞的分選富集裝置及其分選富集方法

有效

• 申請號: 201710317097.2
• 申請日: 2017-05-08
• 公開（公告）號: CN107008516B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發明（設計）人: 彭爽;葉鋒
• 申請（專利權）人: 北京旌準醫療科技有限公司
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;G01N1/40
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 何自剛

本發明公開了一種腸壁脫落細胞的分選富集裝置及其分選富集方法，包括富集器和連通富集器頂部的分離器，分離器為具有分離腔的柱狀結構，分離器包括分別與其連通的原料進口和樣品出口，分離腔內設置有過濾組件；富集器包括富集腔，富集腔上連通樣品通道、富集通道、緩沖液通道和廢液通道，樣品通道與富集通道經第一通道連通富集腔，緩沖液通道與廢液通道經第二通道連通富集腔，富集腔內設置有富集組件，樣品出口與樣品通道連通。基于上述結構，利用細胞自身尺寸的物理特性，實現了對待檢細胞的分離和富集，從而提高了腸壁脫落細胞的提取純度，避免待測細胞被破壞，同時提取過程簡單，有效保證了檢測的準確性。

技術領域

本發明涉及醫學檢測技術領域，具體涉及一種腸壁脫落細胞的分選富集裝置。本發明還涉及一種用于該分選富集裝置的分選富集方法。

背景技術

中國國家腫瘤中心2015年的數據顯示，消化道相關的腫瘤發生率和致死率排名和靠前，因此針對消化道相關腫瘤的臨床應用，尤其是診斷和治療，具有重大的臨床意義。以結直腸癌為例，致死率高的一個主要原因在于結直腸癌早期無明顯的臨床癥狀，等到患者病情明顯而就診時，大多數已發展成腫瘤中晚期，如果能對結直腸癌進行早期的臨床診斷和治療，將極大的提高患者的存活率。

目前已有的結直腸癌臨床診斷的方法主要有結腸鏡檢測、大便隱血檢測，糞便RNA或DNA檢測及液體活檢等。其中糞便DNA檢測隨著精準醫療的發展，由于無創、樣品易獲取以及較高的診斷特異性等特點，逐漸成為最佳的診斷方法。糞便DNA診斷的步驟包括：糞便樣品的采集，糞便DNA提取，糞便DNA分析診斷。

目前已有的糞便DNA提取的方法有兩類，分別為直接提取糞便中的DNA和富集腸壁脫落細胞后再從細胞中提取DNA。直接提取法的目標為糞便中的DNA，實現方式包括柱式離心管吸附提取法，磁珠捕獲法以及電泳捕獲法。直接提取法的DNA提取背景復雜，除人腸壁脫落細胞DNA外，還有細菌DNA和散落在糞便中的人基因DNA等，因此需要設計高靈敏度的特異性探針，此外還需去除糞便中的多糖等PCR抑制成分。富集腸壁脫落細胞后再提取人基因組DNA，此種方法能夠保證DNA均來源于腸壁脫落細胞，較之直接提取法，雖然具有更好的細胞特異性和結果的準確性，但是目前采用的方法仍然存在一定不足。目前已有的富集腸壁脫落細胞的方法包括：①密度梯度法，利用密度梯度獲取腸壁脫落細胞，此方法雖然獲取的細胞純度較好，但是獲取過程中對細胞的損害較大，目前已很少使用。②淘洗法，將糞便樣品進行過濾淘洗，獲得腸壁脫落細胞。此方法對細胞的損害較小，其缺陷一方面在于不能將細菌、白細胞、微小的食物殘渣等尺寸比腸壁脫落細胞小的物質過濾掉，影響圖片檢測效果，另一方面此方法需要分別進行四次過濾操作，整個操作過程繁瑣，且人為操作過多，容易造成誤操作影響最終的檢測結果。③免疫磁珠法，通過將包被有特異性抗體的磁珠與腸壁脫落細胞的表面特異性抗原結合，然后使用磁器對表面粘附有磁珠的細胞進行富集。此方法雖然快捷，但是對抗原的特異性和活性要求較高，不能避免糞便中粘液等物質的影響，因此檢出率不高。

因此，提供一種腸壁脫落細胞的分選富集裝置及其分選富集方法，以期提高腸壁脫落細胞的提取純度，避免待測細胞被破壞，簡化提取過程，有效保證檢測的準確性。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種腸壁脫落細胞的分選富集裝置，以期提高腸壁脫落細胞的提取純度，簡化提取過程，有效保證檢測的準確性。本發明的另一目的是提供一種用于該分選富集裝置的分選富集方法。

為了實現上述目的，本發明提供一種腸壁脫落細胞的分選富集裝置，包括富集器和連通所述富集器頂部的分離器，所述分離器為具有分離腔的柱狀結構，所述分離器包括分別與其連通的原料進口和樣品出口，所述分離腔內設置有過濾組件；所述富集器包括富集腔，所述富集腔上連通具有第一閥的樣品通道、具有第二閥的富集通道、具有第三閥的緩沖液通道和具有第四閥的廢液通道，所述樣品通道與所述富集通道經第一通道連通所述富集腔，所述緩沖液通道與所述廢液通道經第二通道連通所述富集腔，所述富集腔內設置有富集組件，所述樣品出口與所述樣品通道連通。