[發明專利]一種椴樹的組織培養基及其快速繁殖的方法

有效

• 申請號: 201710316354.0
• 申請日: 2017-05-05
• 公開（公告）號: CN107135945B
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發明（設計）人: 季翔;胡春宏;常蘋;王晨;王婷婷
• 申請（專利權）人: 江蘇東郁園林科技有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01H4/00
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 倪志華

1.一種椴樹的組織培養基，包括誘導培養基、增殖培養基以及生根培養基，其特征在于：所述誘導培養基由如下組分組成：MS培養基：4630～4640mg，噻苯隆TDZ：0.001～0.010mg，赤霉素：2～3mg，瓊脂：5～8g，蔗糖：25～40g，肌醇：90～110mg，加入水補足至1升，所述增殖培養基由如下組分組成：MS培養基：4630～4640mg，噻苯隆TDZ：0.001～0.010mg，赤霉素：2～3mg，瓊脂：5～8g，蔗糖：25～40g，肌醇：90～110mg，加入水補足至1升，所述生根培養基由如下組分組成：MS培養基：2315～2320mg，吲哚丁酸IBA：1.0mg～2.0mg，萘乙酸NAA：1.0mg～2.0mg，瓊脂：5～8g，蔗糖：10～20g，加入水補足至1升。

2.根據權利要求1所述的一種椴樹的組織培養基，其特征在于：所述誘導培養基由如下組分組成：MS培養基：4636.43mg，噻苯隆TDZ：0.005mg，赤霉素：2.5mg，瓊脂：6g，蔗糖：30g，肌醇：100mg，加入水補足至1升，所述增殖培養基由如下組分組成：MS培養基：4636.43mg，噻苯隆TDZ：0.005mg，赤霉素：2.0mg，瓊脂：6g，蔗糖：30g，肌醇：100mg，加入水補足至1升，所述生根培養基由如下組分組成：2318.22mg，吲哚丁酸IBA：1.5mg，萘乙酸NAA：1.5mg，瓊脂：6g，蔗糖：15g，加入水補足至1升。

3.一種椴樹的快速繁殖方法，其特征在于：包括如下培養步驟：

S1：選用外植體，外植體選用健康椴樹當年生枝條的芽體飽滿的半木質化枝條莖尖部分；

S2：消毒及初代培養，將椴樹外植體葉片剪去，清水沖洗干凈，在工作臺上把沖洗過的外植體放入濃度為75%的酒精中消毒30秒，再用無菌水沖洗3～4次，將外植體放置在消毒液中浸泡60分鐘，完成消毒后，將外植體接種到根據權利要求1所述的誘導培養基內，在光照強度1500Lx條件下，溫度16℃，暗光培養1周，后轉溫度23℃，光照時間16h，培養6周；所述消毒液包括如下組分：白貓漂白水1份及3份無菌水；

S3：繼代培養：在所述誘導培養基內30～40天，外植體莖尖出現新梢時將外植體轉接到根據權利要求1所述的增殖培養基內，在一定的培養環境下，每隔四周轉接到新的增殖培養基內；

S4：生根培養：經過繼代培養的椴樹組培苗，外植體出現頂芽時，取2～3cm的頂芽，放入根據權利要求1所述的生根培養基，直至生根完成培養。

4.根據權利要求3所述的一種椴樹的快速繁殖方法，其特征在于：所述步驟S3中培養環境為在光照強度1500Lx，溫度為25℃，光照時間16小時，在黑暗條件，溫度為23℃，放置時間8小時。

5.根據權利要求3所述的一種椴樹的快速繁殖方法，其特征在于：所述培養基均經過滅菌處理，將配制好的培養基放置在滅菌鍋內，在0.105MPa壓力，溫度為121℃的情況下，滅菌15～30min。

6.根據權利要求3所述的一種椴樹的快速繁殖方法，其特征在于：所述培養基內還添加有抗氧化劑，所述抗氧化劑為半胱氨酸。

7.根據權利要求3所述的一種椴樹的快速繁殖方法，其特征在于：所述培養基內還添加有0.1～0.5g的活性炭。