[發明專利]定量檢測污泥中含硫氨基酸的方法在審
| 申請號： | 201710315596.8 | 申請日： | 2017-05-08 |
| 公開（公告）號： | CN107238664A | 公開（公告）日： | 2017-10-10 |
| 發明（設計）人： | 章婷婷;何群彪;陳陽;薛勇剛;吳芳芳;朱倩倩;戴曉虎;戴翎翎;黃永西 | 申請（專利權）人： | 同濟大學蘇州研究院;上海城市污染控制工程研究中心有限公司;蘇州同德環保科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 蘇州銘浩知識產權代理事務所(普通合伙)32246 | 代理人： | 王軍 |
| 地址： | 215101 江蘇省蘇州*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 定量 檢測 污泥 中含硫 氨基酸 方法 | ||
1.定量測定污泥中含硫氨基酸的方法，其特征在于，按如下步驟進行：
a、將污泥樣品于冷干機冷干，用球磨機對冷干樣品進行研磨，而后過篩，低溫保存;
b、將含半胱氨酸、蛋氨酸的污泥樣品經過甲酸氧化，制備性質穩定的磺基丙氨酸和蛋氨酸砜;
c、用濃鹽酸對污泥氧化液進行水解，水解液經3kD濾膜超濾，去除污泥中大分子雜質，純化氨基酸;
d、將污泥中的氨基酸與衍生劑鄰苯二甲醛進行衍生反應，生成有熒光吸收的衍生產物;
e、將衍生產物用高效液相色譜進行分析，定量檢測污泥中的含硫氨基酸。
2.根據權利要求1所述的定量檢測污泥中含硫氨基酸的方法，其特征在于，a步驟是取污泥40ml于50ml離心管于-20℃冷凍；將冷凍污泥置于冷干機中，在-40℃條件下冷干3天；將污泥冷干樣用球磨機于4500rmp條件下粉碎10min;將粉碎后的污泥樣品過200目篩，于-50℃冰箱保存。
3.根據權利要求2所述的定量檢測污泥中含硫氨基酸的方法，其特征在于，b步驟是取a步驟的污泥樣品0.0500g于水解管中，加入過甲酸1.5ml，于50℃條件下，水浴氧化30min；向污泥氧化液中加0.4ml偏重亞硫酸鈉溶液，終止氧化反應；所述過甲酸溶液是將30%的過氧化氫溶液與88%的甲酸溶液按照體積比為1：9混合，在常溫下放置1h制得，此溶液現用現配；所述偏重亞硫酸鈉溶液是將33.6g偏重亞硫酸鈉加水定容至100ml制得。
4.根據權利要求3所述的定量檢測污泥中含硫氨基酸的方法，其特征在于，c步驟是向b步驟制得的污泥氧化液中加入5.1ml濃度為8.2mol/l的鹽酸溶液；向水解管中通氮氣30s，密封水解管，將水解管置于105℃烘箱中水解22h；取出水解管，置于室溫冷卻，開啟水解管，將水解管內污泥水解液移入茄形旋轉蒸發瓶中，并用1ml濃度為0.1mol/l鹽酸洗出殘留水解液，反復三次，將污泥水解液于40℃、-10bar條件下，旋轉蒸發至干；用0.1mol/l鹽酸將茄形旋轉蒸發瓶中的氨基酸樣品溶出，并定容至10ml；取定容后的水解液400μl于3kD超濾離心管中，于13805g離心力下離心40min制得污泥氨基酸超濾液；所述8.2mol/l鹽酸溶液是將純鹽酸683ml定容至1000ml制得；所述0.1mol/l鹽酸溶液是將純鹽酸8.3ml定容至1000ml制得。
5.根據權利要求4述的定量檢測污泥中含硫氨基酸的方法，其特征在于，d步驟是將c步驟所得的污泥氨基酸超濾液200μl加入內插管中，依據如下程序步驟進行在線衍生：進樣針吸取2.5μl且pH為10.2的硼酸緩沖鹽溶液，吸取0.5μl污泥氨基酸超濾液，吸取0.5μl鄰苯二甲醛衍生劑，吸取3μl空氣以最大速率混合6次；吸取32μl且pH為6.5的二水合磷酸二氫鈉稀釋液，吸取空氣18μl以最大速率混合2次，完成氨基酸衍生過程；所述pH為10.2的硼酸緩沖鹽溶液，稱取2.50g硼酸，加水溶解，于100ml容量瓶定容得0.4mol/l硼酸溶液，用10mol/l氫氧化鈉溶液調pH至10.2；所述10mol/l氫氧化鈉溶液，稱取40g氫氧化鈉，加水溶解，于100ml容量瓶定容制得；所述鄰苯二甲醛溶液，稱取80.0mg鄰苯二甲醛，加7ml硼酸緩沖液溶解，再加1ml乙腈、125μl巰基丙酸混勻；所述pH為6.5的二水合磷酸二氫鈉稀釋液，稱取2.6408g磷酸二氫鉀，加水溶解，于1000ml容量瓶定容，用10mol/l氫氧化鈉調pH為6.5，再加4ml磷酸。
6.根據權利要求4述的定量檢測污泥中含硫氨基酸的方法，其特征在于，e步驟的色譜流動相A、流動相B、流速、洗脫梯度、激發波長Ex=340nm、發射波長Em=460nm；所述流動相A是將甲醇、乙腈、水按照體積比為45:45:10混合制得，使用前超聲脫氣30min；所述流動相B是稱取2.6408g磷酸二氫鉀，加水溶解，于1000ml容量瓶定容，用10mol/l氫氧化鈉調pH為6.5制得，使用前過0.22μm濾膜過濾，超聲脫氣30min；所述流動相梯度如下表所示：
。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于同濟大學蘇州研究院;上海城市污染控制工程研究中心有限公司;蘇州同德環保科技有限公司，未經同濟大學蘇州研究院;上海城市污染控制工程研究中心有限公司;蘇州同德環保科技有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710315596.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
