[發明專利]一種日本囊對蝦育種群體抗高氨氮與生長性狀的選育方法

有效

• 申請號: 201710315516.9
• 申請日: 2017-05-08
• 公開（公告）號: CN107155985B
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 蔣湘;劉建勇;曾鳳仙;謝苗;劉永奎;冉春麗
• 申請（專利權）人: 湛江國聯水產開發股份有限公司;廣東海洋大學
• 主分類號: A01K61/59
• 分類號: A01K61/59
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 談杰

1.一種日本囊對蝦育種群體抗高氨氮與生長性狀的選育方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)親蝦引進：收集日本囊對蝦的野生群體多尾，平均分配至多個養育池中進行培育，并使用營養物質促進蝦的性腺成熟；

(2)家系建立：待親蝦成熟穩定后摘除單側眼柄，每天晚上挑選性腺飽滿連續、發育成熟的親蝦到產卵桶內產卵,1尾親蝦放1個產卵桶，所產后代為1個全同胞家系，次日將未產卵親蝦放回原養育池中，已產卵親蝦放回其他養育池中；待卵孵化后，收集無節幼體，消毒后轉移到科研車間育苗桶內開始單獨培育蝦苗，10天內按此過程共建立家系100個并依次編號，育苗過程中淘汰部分家系；所有家系均經過單獨培育，家系之間嚴格避免相互混雜；

(3)抗高氨氮預實驗：采用急劇攻毒實驗，試驗液為NH₄Cl溶于養殖海水制得，設置高氨氮濃度梯度和1個對照組，高氨氮濃度梯度分別為4、8、16、32、64和128mg/L,每組設置1個平行組，統計攻毒48h后存活個體數，依照線性回歸法計算半致死濃度；

(4)選育家系的抗高氨氮實驗：抗高氨氮實驗在養育池進行，加海水若干，調配海水NH₄Cl濃度為所計算的半致死濃度，每個家系隨機挑選個體30尾裝入網框內，1個家系3個重復組，每個網框做好標記，按照編號統一放置在養育池中，實驗過程中不投料，每隔一段時間檢查一次，統計死亡個體數，測量已死亡個體的生長性狀；

(5)抗高氨氮數據記錄：記錄個體的表型數據,并按家系順序排列，所有個體生長性狀與抗逆性狀一一對應，為模型設定1個遺傳組，父母本都納入遺傳組中，按照方差組分和遺傳參數估計所使用軟件的要求,對數據進行整理和排列；其中，存活性狀為二項分布的分類變量，以二進制數據來表示個體的存活狀態，1為存活，0為死亡，按照廣義線性模型建模型并統計家系存活率；

(6)遺傳評估模型建立：建立多性狀線性動物模型,對于每一個體生長性狀的觀察值y均可剖分為:

y_ijk＝u+H_i+bd_j+a_k+e_ijk

其中i,j,k分別表示池號、日齡號、個體編號,y_ijk為性狀觀測值，u為總體平均值,H i為固定效應,d_j為日齡協變量，b為回歸系數，a_k為個體隨機效應，e_ijk為隨機殘差效應；體長、腹長與體重的遺傳力計算公式為:

式中σ_a²為加性遺傳方差組份，σ_e²為隨機方差組份；

抗逆性實驗結束后,統計所有實驗個體的存活情況,得到各家系存活率,應用閾模型和廣義線性混合模型方法估計存活性狀的方差組份,育種分析模型為公母畜模型：

式中，y_ijkls為第S個體的存活狀態，1為存活，0為死亡，L_ijkls為潛在變量，如果L_ijkls0，那么y_ijkls＝1，如果y_ijkls≤0，那么y_ijks＝0，u為總體平均值，Hi為固定效應,d_j為日齡協變量，b為回歸系數，s_k為第k個父本加性遺傳效應,d_l為第l個母本加性遺傳效應；

存活性狀遺傳力計算公式：式中，σ_sd²為公母畜方差組份均值，σ_e²為殘差方差組份，廣義線性混合模型使用的非線性連接函數為Logistic，logistic分布值為

在迭代REML過程中，保證達到整體的最大化，收斂標準為兩次迭代所得估計值的方差小于10^-6；利用軟件模型估計體長、腹長、體重的遺傳相關與表型相關系數，利用多性狀閾模型估計生長性狀與抗高氨氮性狀的遺傳相關與表型相關參數，所建家系均為全同胞家系；

(7)家系留種：利用遺傳評估軟件計算家系的平均抗逆性狀與生長性狀的育種值，按照抗高氨氮性狀與生長性狀1:1進行加權得到所有家系的綜合育種值；根據綜合育種值排序，保留排名靠前的10個家系，其余家系淘汰，對保留的家系繼續養殖到親蝦規格；

(8)第二代家系建立：對保留家系每個家系挑選20-50尾親蝦到養育池暫養讓其自然交配，對親蝦的眼柄環進行標記，不同家系的眼柄環附帶不同標記以便識別，避免出現近親交配，以此建立第二代家系100個，按標準化育苗、養殖、抗高氨氮與生長的選育流程直到選育有明顯抗高氨氮與生長優勢的新品種。