[發明專利]一種用于治療心衰保護心臟功能的藥物

在審

• 申請號: 201710311694.4
• 申請日: 2017-05-05
• 公開（公告）號: CN107029211A
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發明（設計）人: 朱偉東
• 申請（專利權）人: 上海市東方醫院(同濟大學附屬東方醫院)
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61P9/04
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司31001
• 代理人: 林煒

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體來說是一種用于治療心衰保護心臟功能的藥物。

背景技術：

Wnt經典信號通路是由質膜上的Wnt受體Frizzled和其共受體LRP5/6共同起始的。Wnt配體與受體結合誘導的LRP5/6-Frizzled復合體的形成是Wnt/β-catenin通路激活所必需的。Wnt信號通路的共受體低密度脂蛋白受體相關蛋白5/6（LRP5/6）屬于低密度脂蛋白受體家族成員。LRP5/6是I型跨膜蛋白， LRP5/6已報道可以和Frizzled直接結合并抑制Frizzled的功能。Frizzled屬于GPCR家族成員，然而對LRP5/6與其他GPCR家族成員的直接關系以及其生理意義報道有限。

GPCR受體家族是一個編碼至少800個不同受體基因的大家族，能分別應答不同的胞外配體，包括激素、神經遞質和環境刺激，參與了多種生理和病理過程。它是目前最為熱門的一大類受體蛋白，糖尿病、心臟病、腫瘤、免疫、感染性疾病、神經和精神疾病的發生都和GPCR有著密切的聯系，市場上大約50%藥物都以它作為靶點。心臟中表達的GPCR也高達200種以上，這些GPCR積極地參與調節正常的心臟生理機能，而其功能的失調則會導致心臟疾病的發生。事實上，心衰的一個重要特征就是GPCR信號通路的過度激活。心臟中GPCR的長期慢性激活不僅是心衰發生的重要誘因也是心衰加重的重要原因。心臟中GPCR的激活會誘導其下游的G蛋白（Gαβγ）信號通路的啟動，然后通過激活PKA/PKC及CaMKII等信號途徑而誘導心肌細胞肥大，導致胎兒基因重編程及心肌細胞凋亡等。這些漸進式的病理性心肌細胞改變會促使心臟纖維化病變，導致心臟發生重塑，收縮能力下降，最終發生嚴重的心衰。

發明內容：

針對現有技術中的上述技術問題，本發明提供了一種用于治療心衰保護心臟功能的藥物，所述的這種用于治療心衰保護心臟功能的藥物要解決心臟中GPCR的激活會誘導導致發生嚴重的心衰的技術問題。

本發明提供了LRP5或者LRP6蛋白在制備治療心衰的藥物中的應用。

本發明還提供了一種用于治療心衰的藥物，含有LRP5或者LRP6蛋白。

本發明還提供了LRP6胞外端結構域蛋白在制備治療心衰的藥物中的應用。

本發明還提供了一種用于治療心衰的藥物，含有LRP6胞外端結構域蛋白。

本發明還提供了一種蛋白質，所述的蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

進一步的，編碼上述蛋白質的氨基酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本發明提供了一種用于治療心衰的藥物，含有上述的蛋白質。

本發明發現，LRP5/6可以和Frizzled直接結合并抑制Frizzled的功能，進而發現LRP5/6可以和Frizzled以外的其他GPCRs直接結合并抑制其功能。本發明選擇一個特定的GPCR受體—β腎上腺素受體（βAR）。結果表明心肌細胞內的LRP5/6具有抑制βAR的功能，從而也證實了LRP5/6的確具有抑制GPCR而保護心臟功能的作用。

本發明首先通過免疫共沉淀技術以及far western技術證明LRP5/6和GPCR發生直接相互作用；其次通過熒光素酶雙報告基因分析檢測LRP5/6受體對ligand-GPCR激活的CRE responsive-luciferase表達以及配體激活GPCRs瞬間的cAMP產量產生的影響；敲除心肌細胞的LRP5/6檢測其對GPCR受體mRNA表達的調控情況。由于LRP5/6與βAR受體結合位點在LRP6胞外端結構域，分別在體外體內實驗中檢測LRP6胞外端結構域蛋白通過抑制βAR信號通路在心衰疾病中發揮的作用。

本發明首次解析了LRP6受體與GPCR受體以直接結合的方式相互作用且LRP6受體可通過直接結合GPCR受體影響其活性且其主要結合發揮抑制作用的是其胞外端結構域。目前GPCR受體參與了大量的生理及病理過程尤其是心衰的發生。因此，LRP6胞外端結構域蛋白的確具有抑制GPCR而保護心臟的作用 。

本發明和已有技術相比，其技術進步是顯著的。本發明發現LRP5/6和GPCRs受體可通過直接結合相互作用的方式影響GPCR受體的信號通路的激活進而對心臟功能具有保護作用。

附圖說明

圖1顯示了免疫共沉實驗顯示：LRP6與βAR受體發生免疫共沉。