[發明專利]液體活檢血液中循環腫瘤核酸和細胞的穩定劑及其采血管

有效

• 申請號: 201710307593.X
• 申請日: 2017-05-03
• 公開（公告）號: CN107156106B
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 陳曉梅;馬圓
• 申請（專利權）人: 云南仁橋醫療科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;C12N15/10;A61B5/154
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 姚亮

1.一種液體活檢血液中循環腫瘤核酸和細胞的穩定劑，以重量份計，該穩定劑包括20-100份的防腐劑、5-50份的抗氧化劑、1-35份的抗凝劑、5-20份的pH穩定劑、5-20份的酶抑制劑、0.1-10份的細胞凋亡抑制劑、5-25份的自由基捕獲劑和1-10份的代謝抑制劑；

所述防腐劑包括利福平、魚精蛋白、殼聚糖、果膠分解物、三氯叔丁醇、羧甲纖維素、聚山梨酯、山梨酸、羥苯乙酯和石墨烯納米抗菌材料中的一種或多種的組合；

所述抗氧化劑包括維生素C、蝦青素、類胡蘿卜素、特丁基對苯二酚、二丁基羥基甲苯、二叔丁基羥基甲苯和2,3,6,7,10,11-六羥基三苯中的一種或多種的組合；

所述抗凝劑為二乙胺四乙酸鉀鹽；

所述自由基捕獲劑的制備方法包括以下步驟：

以多元胺作為引發劑，加入有機溶劑、催化劑和開環材料，進行開環聚合，得到產物A；

將產物A用乙醚提純，然后用反向硅膠柱進一步提純，得到產物B；

將產物B溶于有機溶劑中，加入催化劑和開環材料，進行開環聚合，并采用乙醚和反向硅膠柱依次提純產物，得到兩親性多臂星形聚合物；

將納米材料溶于超純水中超聲，然后加入氨水及硅化劑進行硅基化修飾，分離得到產物C，將產物C用氨基酸進行包被，得到產物D；

取產物D、兩親性多臂星形聚合物，加入N-羥基琥珀酰亞胺進行端基修飾反應，得到自由基捕獲劑；

所述代謝抑制劑包括氨基葡萄糖鹽酸鹽和/或金精三羧酸。

2.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述防腐劑為由利福平、魚精蛋白、殼聚糖和羥苯乙酯所組成的組合物，其中：利福平、魚精蛋白、殼聚糖和羥苯乙酯質量比為(1-2)：(3-5)：(2-10)：(5-10)。

3.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述石墨烯納米抗菌材料制備方法為：利用水熱法培養石墨烯納米材料，并將1g石墨烯納米材料溶于50mL超純水中并超聲分散，得到分散液；然后向分散液中加入20g-50g的十八烷基二甲基三甲氧基硅烷基丙基氯化銨，超聲震蕩48h、水浴5h、攪拌反應10h、過濾、洗滌、干燥得到石墨烯納米抗菌材料。

4.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述抗氧化劑為由維生素C、蝦青素、類胡蘿卜素和特丁基對苯二酚所組成的組合物，其中：維生素C、蝦青素、類胡蘿卜素和特丁基對苯二酚質量比為(1-5)：(2-5)：(3-10)：(1-5)。

5.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述pH穩定劑包括Tris-HCl緩沖液和/或檸檬酸。

6.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述酶抑制劑包括二硫蘇糖醇、三(2-羧乙基)膦、巰基乙醇和亞硫酸氫鈉中的一種或多種的組合。

7.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述細胞凋亡抑制劑包括Q-VD-OPh。

8.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述開環材料包括己內酯、丙交酯、乙烯亞胺、環氧乙烷、谷氨酸和賴氨酸中的一種或多種的組合。

9.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述催化劑包括辛酸亞錫和/或氯化鋅。

10.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述多元胺包括三乙烯四胺、乙二胺、二乙烯三胺和四亞乙基五胺中的一種或多種的組合。

11.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述有機溶劑包括二氯甲烷或二甲基亞砜。

12.根據權利要求1所述的穩定劑，其特征在于：所述氨基酸包括賴氨酸、絲氨酸和異亮氨酸中的一種或多種的組合。