[發明專利]一種檢測待測樣本中目標蛋白的含量的方法有效
| 申請號: | 201710306828.3 | 申請日: | 2017-05-04 |
| 公開(公告)號: | CN108802366B | 公開(公告)日: | 2020-01-21 |
| 發明(設計)人: | 于瑤;韓劍;林白雪;陶勇 | 申請(專利權)人: | 中國科學院微生物研究所;中國科學院大學 |
| 主分類號: | G01N33/535 | 分類號: | G01N33/535;G01N33/68 |
| 代理公司: | 11245 北京紀凱知識產權代理有限公司 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100101 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 目標蛋白 待測樣本 親和素系統 融合蛋白 生物素 種檢測 抗體 生物素修飾 大腸桿菌 濃度調整 可檢測 抗原 肽段 催化 蛋白 放大 體內 檢測 引入 應用 | ||
1.一種檢測待測樣本中目標蛋白的含量的方法,包括步驟(a)、步驟(b)和步驟(c):
所述步驟(a)包括如下步驟:
(a-1)復合物和待測樣本混勻,孵育;
(a-2)完成步驟(a-1)后,采用親和素檢測熒光信號值;
所述步驟(b)包括如下步驟:
(b-1)所述復合物和目標蛋白標準溶液混勻,孵育;
(b-2)完成步驟(b-1)后,采用所述親和素檢測熒光信號值;
所述步驟(c):根據所述目標蛋白標準溶液中目標蛋白的濃度和相應熒光信號值繪制標準曲線,將所述步驟(a-2)得到的熒光信號值代入所述標準曲線,得到待測樣本中目標蛋白的含量;
所述復合物為一個末端連接目標蛋白抗體、另一個末端連接生物素的特異肽段;所述特異肽段為a1)或a2)或a3)或a4):a1)bap1肽段;a2)bap2肽段; a3)bap5肽段;a4)bap10肽段;
所述bap1肽段為氨基酸序列是序列表中序列3自N端起第222至238位所示的肽段;所述bap2肽段為氨基酸序列是序列表中序列6自N端起第222至263位所示的肽段;所述bap5肽段為氨基酸序列是序列表中序列9自N端起第222至338位所示的肽段;所述bap10肽段為氨基酸序列是序列表中序列12自N端起第222至463位所示的肽段;
所述生物素可與親和素結合。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述親和素為卵白親和素。
3.一種檢測待測樣本中目標蛋白的含量的試劑盒甲,包括權利要求1或2所述復合物和親和素。
4.如權利要求3所述試劑盒甲,其特征在于:所述試劑盒甲還包括目標蛋白標準溶液。
5.權利要求3或4所述試劑盒甲在檢測待測樣本中目標蛋白的含量中的應用。
6.權利要求1或2中所述復合物在檢測待測樣本中目標蛋白的含量中的應用。
7.權利要求1或2中所述復合物。
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