[發明專利]一種重組人源III型膠原蛋白的純化方法和制備方法有效
| 申請號： | 201710306215.X | 申請日： | 2017-05-03 |
| 公開（公告）號： | CN107033238B | 公開（公告）日： | 2020-09-01 |
| 發明（設計）人： | 賈芳苗;劉冬;鄧飛 | 申請（專利權）人： | 河南多美康生物藥業有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/78 | 分類號： | C07K14/78;C07K1/113 |
| 代理公司： | 北京坦路來專利代理有限公司 11652 | 代理人： | 汪送來 |
| 地址： | 450000 河南省鄭州市航空港區黃海路與*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 iii 膠原 蛋白 純化 方法 制備 | ||
1.一種重組人源III型膠原蛋白的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：將由具有表達出重組人源III型膠原蛋白能力的重組酵母菌發酵得到的發酵液進行第一次熱處理，得到變性液，所述第一次熱處理的溫度為65-75℃；往所述變性液中加入硫酸銨至飽和度為28-30％，收集沉淀；用含18-22mM檸檬酸鹽、48-52mM氯化鈉、pH為5.8-6.2的第一緩沖液進行換液，溶解沉淀得到粗蛋白液；將所述粗蛋白液加入至層析柱，并用含18-22mM檸檬酸鹽、145-155mM氯化鈉、pH為5.8-6.2的第二緩沖液換液進行低鹽洗脫；將第二緩沖液洗脫后的洗脫液用含18mM檸檬酸鹽、245-255mM氯化鈉、pH為5.8-6.2的第三緩沖液換液進行高鹽洗脫，收集洗脫液；用30KD超濾膜包18-22mmol/L pH為5.8-6.2的檸檬酸鹽緩沖液對第三緩沖液洗脫后的洗脫液進行脫鹽換液，得到膠原蛋白溶液；對所述膠原蛋白溶液進行第二次熱處理，所述第二次熱處理的溫度為65-75 ℃，時間為8-12min；
所述重組酵母菌的保藏編號為CGMCC No.12491。
2.一種重組人源III型膠原蛋白的制備方法，其特征在于，其包括：培養具有表達出重組人源III型膠原蛋白能力的重組酵母菌，獲取發酵液；
所述重組酵母菌的保藏編號為CGMCC No.12491；所述發酵液按權利要求1所述的重組人源III型膠原蛋白的純化方法進行純化，得到重組人源III型膠原蛋白。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于河南多美康生物藥業有限公司，未經河南多美康生物藥業有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710306215.X/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
