[發(fā)明專利]3-硝基酪氨酸的分子印跡電化學(xué)傳感器的制備及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710302370.4
• 申請日: 2017-05-02
• 公開（公告）號: CN107085022B
• 公開（公告）日: 2019-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘育方;汪世橋;翟海云;周清;楊帆
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東藥科大學(xué)
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 佛山幫專知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44387
• 代理人: 胡麗琴

本發(fā)明公開一種3?硝基酪氨酸的分子印跡電化學(xué)傳感器的制備及應(yīng)用，首先將多壁碳耦合氧化石墨烯納米帶滴涂于玻碳電極上，得到功能化納米材料電極，電極在摻雜納米金?分子印跡聚合物溶液中表面聚合分子印跡聚合物和沉積摻雜納米金，形成一層分子印跡膜，去除3?硝基酪氨酸模板分子得到功能化納米材料分子印跡電化學(xué)傳感器。本發(fā)明公開的傳感器，選擇性好；對生物標(biāo)記物3?硝基酪氨酸靈敏度高；具有制作簡單、性能穩(wěn)定，能重復(fù)使用；且制備價(jià)格低廉，樣品前處理簡單，檢測快速，設(shè)備便攜適合現(xiàn)場檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)分析領(lǐng)域，涉及電化學(xué)傳感器，具體涉及一種分子印跡電化學(xué)傳感器，尤其是一種3-硝基酪氨酸的功能化納米材料分子印跡電化學(xué)傳感器的制備及應(yīng)用。

背景技術(shù)

氧化還原系統(tǒng)在失衡條件下產(chǎn)生了大量的自由基，3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)是由自由基中的過氧化亞硝酸陰離子(ONOO^-)與游離的酪氨酸或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的酪氨酸相互作用發(fā)生了硝基化而生成的。3-硝基酪氨酸能使得蛋白質(zhì)結(jié)果及功能發(fā)生變化，最終導(dǎo)致細(xì)胞損傷。例如，胰腺中的3-硝基酪氨酸不僅能導(dǎo)致胰島β細(xì)胞損傷，還可以導(dǎo)致胰島素空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而使得胰島素與受體結(jié)合能力下降。

近年來，國外已有研究發(fā)現(xiàn)在許多疾病如心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、動脈粥樣硬化、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、2型糖尿病等病變的相應(yīng)組織蛋白中都可以檢測到3-硝基酪氨酸的存在。與3-硝基酪氨酸相關(guān)的疾病多由氧化應(yīng)激所導(dǎo)致，且3-硝基酪氨酸作為在機(jī)體內(nèi)殘留氧化產(chǎn)物之一，所以目前有研究認(rèn)為3-硝基酪氨酸也許可以作為氧化應(yīng)激誘導(dǎo)疾病診斷的生物標(biāo)記物。

目前，分析3-硝基酪氨酸有HPLC、液質(zhì)、氣質(zhì)串聯(lián)液質(zhì)等多種方法，但分析的樣品前處理步驟繁瑣且需要昂貴的大型分析儀器，分析成本較高。因此，研制簡單靈敏、選擇性高、耗樣量少、成本低的新方法用于血液和尿液中3-硝基酪氨酸的分析測定，對相關(guān)疾病的早期診斷具有重大意義。

分子印跡技術(shù)是以目標(biāo)分子為模板，以合適的物質(zhì)作為單體，模板和單體通過共價(jià)鍵或通過分子間力進(jìn)行預(yù)組裝，通過單體的聚合，模板分子被嵌入聚合物網(wǎng)絡(luò)中，將模板從聚合物中洗脫后，聚合物中留下與模板分子空間相匹配的具有多重作用點(diǎn)的印跡孔穴。分子印跡技術(shù)具有預(yù)定性、特異識別性和廣泛實(shí)用性等顯著特點(diǎn)，其能夠很好應(yīng)用于色譜分離、固相萃取、仿生傳感器、膜分離等諸多領(lǐng)域。這項(xiàng)技術(shù)目前受到人們越來越多的關(guān)注。

分子印跡電化學(xué)傳感器具有選擇性好、靈敏度高、有一定使用壽命可再生等特點(diǎn)，在應(yīng)用于藥物分析、生命科學(xué)研究中起著十分重要的作用。但是傳統(tǒng)的印跡方法所制備的印跡膜厚度難以控制，高交聯(lián)度使得電子傳遞速度和響應(yīng)慢、檢測下限高而且再生和可逆性差，影響分子印跡技術(shù)在電化學(xué)傳感器中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明通過將分子印跡與電化學(xué)傳感器相結(jié)合，提供了一種3-硝基酪氨酸分子印跡電化學(xué)傳感器的制備方法及應(yīng)用，提供的方法首先在玻碳電極表面上通過滴涂多壁碳耦合氧化石墨烯納米帶的修飾，提高了傳感器的靈敏度，接著采用電聚合方法以吡咯為功能單體、3-硝基酪氨酸為模板分子，在電聚合過程中同時(shí)電沉積摻雜納米金來制備3-硝基酪氨酸分子印跡電化學(xué)傳感器；運(yùn)用本發(fā)明制備的傳感器檢測血樣、尿液中的3-硝基酪氨酸分子，檢測度靈敏可靠。

為解決上述問題，一方面，本發(fā)明在于提供一種3-硝基酪氨酸的分子印跡電化學(xué)傳感器的制備方法，具體步驟如下：

1)多壁碳耦合氧化石墨烯納米帶懸濁液滴在玻碳電極表面沉積后電活化得到多壁碳耦合氧化石墨烯納米帶修飾電極；

2)多壁碳耦合氧化石墨烯納米帶修飾電極在摻雜納米金-分子印跡聚合物溶液中表面聚合分子印跡聚合物和沉積摻雜納米金，形成一層分子印跡聚合膜；所述分子印跡聚合物以吡咯為功能單體、以3-硝基酪氨酸為模板分子；

3)將步驟2)制備的傳感器中的3-硝基酪氨酸模板分子去除，制得所述3-硝基酪氨酸的分子印跡電化學(xué)傳感器。