[發(fā)明專利]一種新生騾駒溶血病檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710301765.2
• 申請(qǐng)日: 2017-05-02
• 公開（公告）號(hào): CN106970233B
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟凡生
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 臨沂大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/80
• 分類號(hào): G01N33/80
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 張勇

本發(fā)明提供一種檢測新生騾駒溶血病的試劑盒，一種新生騾駒溶血病檢測試劑盒，所述試劑盒包括一列試劑制備瓶和一列診斷管，所述試劑制備瓶包括5個(gè)空的具塞試劑瓶，用于配制初乳稀釋液；所述診斷管包括4個(gè)具塞凝膠管，每一個(gè)凝膠管中部設(shè)置砂芯，砂芯上預(yù)裝填凝膠懸浮液。本發(fā)明同時(shí)提供了該試劑盒的制備方法，包括凝膠懸浮介質(zhì)的制備，凝膠的制備，凝膠的制備，凝膠懸浮液的制備以及凝膠管中預(yù)裝填凝膠懸浮液。采用本發(fā)明方法制備的新生騾駒溶血病檢測試劑盒，檢測靈敏度高且質(zhì)量穩(wěn)定，大大縮短了檢測時(shí)間；現(xiàn)象明顯，便于肉眼觀察；無需對(duì)照組，檢測效率高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種新生騾駒溶血病檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術(shù)

初生騾駒溶血病主要是初生馬騾駒突然發(fā)生的一種急性溶血性疾病，主要特征是貧血、黃疸和血色素尿，故又稱為溶血性黃疸，馬騾駒發(fā)病率有時(shí)高達(dá)30％，發(fā)病快(出生后數(shù)小時(shí)到三天內(nèi)發(fā)病)，若不及時(shí)治療，死亡率極高。

騾駒是馬和驢的雜交后代，其紅細(xì)胞膜上帶有來自父系的種屬性抗原。妊娠期間，如果胎盤有輕微的損傷，胎兒紅細(xì)胞就能進(jìn)入母體血液循環(huán)，刺激母體產(chǎn)生抗體。如一懷孕母馬尤其胎兒紅細(xì)胞抗原所致敏，產(chǎn)生的抗體在分娩前就有選擇的分布于初乳之中，這些抗體被新生騾駒咽下后，由小腸吸收進(jìn)入體循環(huán)，破壞幼駒的紅細(xì)胞，發(fā)生溶血病。

由于發(fā)病后再治療，多有時(shí)來不及搶救，故應(yīng)在發(fā)病前預(yù)先診斷。目前所采用的的檢測方法有酶試驗(yàn)法、凝聚胺法、微膠柱法等，傳統(tǒng)試管方法操作繁瑣、易漏檢、錯(cuò)檢、微膠柱方法成本過高或測得效價(jià)高于實(shí)際效價(jià)。至今，國內(nèi)外沒有專門用于新生騾駒溶血病檢測的易操作、成本低廉的試劑盒生產(chǎn)。

相關(guān)論文中介紹了采用凝集反應(yīng)診斷新生騾駒溶血病的方法，該方法操作簡單，可應(yīng)用于基層獸醫(yī)站。然而所述方法操作中，樣品被放置于平玻璃板上，在室溫下靜置20-30分鐘后觀察。是否產(chǎn)生凝集反應(yīng)，以及凝集反應(yīng)產(chǎn)生的位置并不能清楚觀察，紅細(xì)胞自身凝集也可能被誤認(rèn)為抗原抗體反應(yīng)后的凝集反應(yīng)。

因此，需要一種靈敏度高、特異性好、易于快速、準(zhǔn)確觀察現(xiàn)象且質(zhì)量穩(wěn)定的騾駒溶血病檢測試劑方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述不足，提供一種靈敏度高、特異性好、易于快速、準(zhǔn)確觀察現(xiàn)象且質(zhì)量穩(wěn)定的騾駒溶血病檢測試劑盒。本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)方案如下：

一種新生騾駒溶血病檢測試劑盒，所述試劑盒由一列試劑制備瓶和一列診斷管組成，所述試劑制備瓶包括5個(gè)空的試劑瓶，用于配制初乳稀釋液；所述診斷管包括4個(gè)凝膠管，每一個(gè)凝膠管中部設(shè)置砂芯，砂芯上預(yù)裝填凝膠懸浮介質(zhì)。

其中，所述凝膠管的制備過程包含如下步驟：

步驟一，凝膠懸浮介質(zhì)的制備：

各成分配比如下：

復(fù)合對(duì)羥基苯甲酸酯(3.0-4.5)×10^-3g/ml；

氯化鈉(1.70-1.74)×10^-3g/ml；

甘氨酸(1.73-1.77)×10^-3g/ml；

疊氮鈉(1.73-1.77)×10^-3g/ml；

無水磷酸氫二鈉(1.73-1.77)×10^-3g/ml；

磷酸二氫鉀(1.73-1.77)×10^-3g/ml；

將以上試劑用純化水溶解，調(diào)節(jié)pH值為6.6-6.8；

步驟二，凝膠的制備：