[發明專利]人用水痘病毒滅活疫苗及其制備方法

有效

• 申請號: 201710297864.8
• 申請日: 2017-04-29
• 公開（公告）號: CN107174658B
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 蔣仁生;譚小東;張艷飛;沈慧莉;楊世龍
• 申請（專利權）人: 安徽智飛龍科馬生物制藥有限公司;重慶智飛生物制品股份有限公司;北京智飛綠竹生物制藥有限公司
• 主分類號: A61K39/25
• 分類號: A61K39/25;A61P31/22;A61L2/18;A61L101/36
• 代理公司: 安徽知問律師事務所 34134
• 代理人: 代群群

本發明涉及生物技術領域，具體提供一種人用水痘病毒滅活疫苗及其制備方法，是將β?丙內酯與水痘病毒濃縮液按體積比1：2000～1：8000混合，在3～5℃條件下滅活12～36h，隨后在34～37℃條件下水解1.5～3h，得到滅活病毒液；滅活病毒液經純化、分裝、凍干后制備成滅活疫苗。本方法制備的水痘病毒滅活疫苗安全、有效，接種反應輕微，對不適用減毒活疫苗的免疫功能低下的人群更適用。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及人用水痘病毒滅活疫苗及其制備方法。

背景技術

水痘和帶狀皰疹的病原體均為水痘-帶狀皰疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)。VZV屬皰疹病毒科，為雙鏈DNA病毒。

VZV是一種具有高度傳染性的皰疹病毒，既可引發水痘，也可引發帶狀皰疹(herpes zoster，HZ)；前者通常見于兒童期和年輕成年人，后者則是潛伏VZV再活化和復制導致。在初次感染VZV后，病毒可在感覺神經節中保持休眠狀態，這樣的VZV再活化與免疫功能下降有關，多發生在老年人或免疫功能低下的人群中(Weinberg等人，Journal ofInfectious Diseases(2009)200：1068-77)。有些患者在HZ皮疹痊愈后與HZ相關的疼痛還會持續很長時間。

使用疫苗預防水痘的作用已在全球范圍內得到認同。基于減毒活病毒(VZV Oka株)的水痘疫苗于上世紀70年代和80年代研制和進行臨床試驗。1984年，該疫苗首先在德國和瑞典獲得上市許可。目前市售的有數種凍干水痘減毒活疫苗，可冰箱冷藏或冷凍。這些疫苗有的為單價疫苗(僅含VZV病毒成份)，有的則與麻疹、腮腺炎、風疹三聯疫苗(MMR)制成聯合疫苗。

研究表明單價水痘減毒活疫苗耐受性良好，健康兒童接種水痘疫苗后最常報告的不良事件均較輕微，其中包括注射部位輕度壓痛、發紅和皮疹。然而，活減毒疫苗可能不適用于免疫功能低下的患者。由VZV Oka株引起的罕見并發癥包括肺炎、肝炎、帶狀皰疹腦膜炎、復發性帶狀皰疹、嚴重皮疹以及繼發性VZV傳播，這主要發生于免疫功能受損者或接種時有未被確診的其他嚴重病癥的患者。免疫功能低下的個體，包括患有血液惡性腫瘤的患者、經歷免疫抑制治療的患者、接受造血干細胞移植(HCT)或實體器官移植(SOT)的患者、HIV感染的患者和具有自身免疫性疾病的患者，具有相對于一般群體更高的發展HZ的發病率。此外，這些患者群體處于發展嚴重和威脅生命的并發癥的增加的風險中。目前，對水痘的治療沒有特效藥，以預防為主，只能通過接種水痘疫苗的方法預防感染VZV病毒，所以安全有效的水痘疫苗對高危人群免疫意義重大。

為適應上述免疫低下者使用該疫苗，目前研究人員已經研究開發了滅活疫苗、病毒樣顆粒疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗。通過熱滅活VZV或通過使用亞單位疫苗可以開發對于免疫功能低下受試者的更安全的疫苗(Cohen,J.I.,(2008)J.Infect.Dis.197(Suppl 2):S237-S241)。Redman等人(J.Infectious Diseases(1997)176:578-85)描述了通過在50℃加熱而滅活的并導致1.2pfu/0.5mL的感染性病毒含量的滅活VZV疫苗。然而對于免疫功能低下的患者，即便該水平的感染性也是具有風險的。美國專利號為6214354和5997880提到了使用滅活VZV疫苗的潛能并公開了生產并測試熱處理的疫苗的例子；默沙東公司的專利(CN 103167880A)中使用了γ輻射滅活VZV病毒來制造水痘滅活疫苗。如果開發了滅活VZV的方法，所述方法可制得在免疫功能低下的患者中安全并有效(即無感染性但保留其免疫原性和抗原性)的VZV樣品，這將滿足重大的醫療需要。