[發明專利]固相萃取樣品前處理裝置及處理方法

有效

• 申請號: 201710296389.2
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN106990193B
• 公開（公告）日: 2019-12-13
• 發明（設計）人: 朱建雄
• 申請（專利權）人: 廣東聯捷生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 44224 廣州華進聯合專利商標代理有限公司
• 代理人: 舒丁

本發明公開了固相萃取樣品前處理裝置及處理方法。該裝置包括一柱狀活塞以及筒狀容器；所述柱狀活塞包括活塞主體、收集容器、填料柱、導流管以及頂蓋；所述活塞主體與所述筒狀容器密封配合；所述收集容器位于所述活塞主體內，所述收集容器的頂端具有開口并由所述頂蓋封閉；所述填料柱設于所述活塞主體內，所述填料柱的底端與所述活塞主體的底端連通并設有開口；所述填料柱的頂端通過所述導流管與所述收集容器連通；所述填料柱內填充有線性填料，所述線性填料沿所述填料柱的軸線由所述填料柱底端開口填充到所述填料柱內并平行排列。本發明所述固相萃取樣品前處理裝置及處理方法，可以處理微量的樣品，且分離效率較高，且普適性強，使用溶劑量少。

技術領域

本發明涉及萃取技術領域，具體涉及固相萃取樣品前處理裝置及其使用方法。

背景技術

化學分析過程中絕大多數情況都必須對樣品進行前處理，將待測物從樣品中分離出來并加以濃縮，目的是消除樣品基底物質對分析檢測的干擾和提高分析靈敏度和準確度。最常用的樣品處理方法主要有三類：固相萃取、液-液萃取、沉淀分離。針對不同樣品一般需要開發特定前處理裝置，建立一個完整的分析方法的最花時間的環節往往就是樣品前處理的開發，而完成一個樣品的分析最費時費力的步驟往往也是樣品前處理。

固相萃取是將樣品通過一個固相萃取柱，樣品中的待測物質吸附在萃取柱的填充材料上，然后用合適的緩沖液將樣品中的干擾物質從萃取柱上沖洗除去，最后在用合適的溶劑或緩沖試劑將待測物從萃取柱上洗脫下來并收集。所得萃取溶液一般需要蒸干，干渣用少量溶劑復溶之后才上機檢測。相對于其它樣品前處理技術，固相萃取得到越來越廣泛的應用，關鍵是因為它溶劑用量少，過程容易實現自動化，而且市場上有非常多種類的萃取柱可供選擇，比較難以分離提取的樣品一般總能找到合適的固相萃取柱進行前處理。但是，無論固相萃取方法開發還是萃取操作過程都很費時費事，從大量不同品種的萃取柱中找到最合適某種樣品的萃取柱更是一個繁復甚至不可能的過程。

現有的固相萃取填料基本分為有機類和硅膠類，兩者都是將填料制成微粒狀填充到塑料柱中，微粒越細分離效果越好，但價錢越貴，柱壓也越高。顆粒填料的粒子直徑與分離效率之間的關系存在有兩個競爭因素：一方面微越粒細小比表面越大，待分離物質在柱內可以發生更多的吸附-解吸附過程，從而提高分離效率；另一方面微粒越細顆粒之間的界面越多，待分離物質通過分離柱時就要經歷更多的界面轉移，每次轉移都讓待分離物有機會在溶劑中自由擴散，從而降低分離效率。綜合考慮成本及縮小填料的微粒直徑所能獲得的分離效率的提高幅度，現有固相萃取產品很少采用粒徑50微米以下的填料。正因如此，固相萃取技術的發展基本上只局限于對填料的化學組成的研發，其它方面很少有發展的余地。

樣品前處理在血液中藥物濃度分析中尤其具有挑戰性，因為血樣量通常較小，藥物動力學小鼠實驗時每次甚至只能取幾十微升血，絕大多數情況下只能離心分離血樣中的細胞后用蛋白沉淀法做樣品前處理，得到的回收率有時只有10％左右，而樣品中的血脂血糖等最可能干擾質譜定量分析的物質很難排除。如果用現有的固相萃取分離柱去處理微量血樣，首先必須花費大量時間摸索條件篩選萃取柱和溶劑，得到的萃取液一般在1毫升以上，必須蒸干復溶，否則稀釋比太大，最后得到的回收率極少達到90％以上，常常只有50％以下。

然而，血藥濃度分析是治療藥物個性化用藥的關鍵環節，為了確定一個藥物在某一患者身上的吸收與代謝情況，在患者用藥后必須測定幾個時間點患者血液中的藥物濃度。如果對大部分藥物推行個性化用藥，以達到精準醫療的目的，再大的醫院也不可能容納得了等候取血的患者，更不可能用現有的固相萃取柱對所有血樣一一處理。唯一可能解決的辦法是讓患者自己采集指尖血，即時做完血樣處理，然后直接送檢。最理想就是有一種適應于所有藥物萃取的固相萃取柱，不需要初始化，能把蛋白和血糖血脂等干擾物牢固吸附，用少量溶劑直接沖洗吸附了樣品的萃取柱就可以得純待測物，而且回收率達到90％以上。本發明正是旨在提供一種具備上述功能的線性填充固相萃取柱，用以處理一滴血(5～50微升)，全血或血清的分析前處理。

發明內容