[發明專利]一種豬圓環病毒3型免疫原性組合物、制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710294735.3
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN108785667B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 田克恭;袁于人;李向東;殷波;肖燕;陸洲;胡冬學;孫進忠;莫小兵;張許科
• 申請（專利權）人: 普萊柯生物工程股份有限公司;斯澳生物科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;A61P31/20;C07K14/01
• 代理公司: 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

1.一種豬圓環病毒3型免疫原性組合物，其中，所述免疫原性組合物包括免疫量的所述的豬圓環病毒3型Cap蛋白抗原以及獸醫學上可接受的載體；所述豬圓環病毒3型Cap蛋白抗原為Cap蛋白或重組有所述豬圓環病毒3型Cap蛋白基因的活載體；其中，所述豬圓環病毒3型Cap蛋白為序列SEQ.ID No.1編碼的蛋白。

2.根據權利要求1所述的免疫原性組合物，其中，所述豬圓環病毒3型Cap蛋白含量為≥20μg/ml。

3.根據權利要求1所述的免疫原性組合物，其中，所述豬圓環病毒3型Cap蛋白含量為20μg/ml～100μg/ml。

4.根據權利要求1所述的免疫原性組合物，其中，所述豬圓環病毒3型Cap蛋白含量為20μg/ml～50μg/ml。

5.根據權利要求1所述的免疫原性組合物，其中，所述豬圓環病毒3型Cap蛋白含量為30μg/ml～50μg/ml。

6.根據權利要求1所述的免疫原性組合物，其中，所述重組有所述豬圓環病毒3型Cap蛋白基因的活載體為重組減毒沙門氏菌、重組新城疫病毒、重組痘病毒、或重組腺病毒。

7.根據權利要求1所述的免疫原性組合物，其中，所述獸醫學上可接受的載體包括佐劑，所述佐劑為Gel佐劑，所述佐劑用量為體積比5～20％。

8.根據權利要求7所述的免疫原性組合物，其中，所述佐劑用量為體積比10％。

9.一種制備權利要求1所述免疫原性組合物的方法，其中，所述方法包括：步驟(1)克隆所述豬圓環病毒3型Cap蛋白基因，所述豬圓環病毒3型Cap蛋白為序列SEQ.ID No.1編碼的蛋白，并將所述豬圓環病毒3型Cap蛋白基因重組到表達載體以獲得含有所述豬圓環病毒3型Cap蛋白基因的重組表達載體；

步驟(2)將所述含有所述豬圓環病毒3型Cap蛋白基因的重組表達載體和分子伴侶的表達載體共同轉化大腸桿菌，表達所述豬圓環病毒3型Cap蛋白；

步驟(3)分離所述表達的豬圓環病毒3型Cap蛋白，使用非離子表面活性劑處理除去內毒素；以及

步驟(4)將所述去除內毒素的豬圓環病毒3型Cap蛋白與佐劑混勻，得到所述免疫原性組合物。

10.根據權利要求9所述的方法，其中，所述步驟(1)中所述含有豬圓環病毒3型Cap蛋白基因的重組表達載體為重組pET28a質粒，所述步驟(2)中所述分子伴侶的表達載體為pG-Tf2，所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21(DE3)；所述步驟(3)中非離子表面活性劑為Triton X-114。

11.根據權利要求1～8所述的免疫原性組合物在制備預防豬圓環病毒3型相關疾病的藥物中的應用。

12.一種豬圓環病毒3型Cap蛋白，其蛋白序列為SEQ.ID No.1所編碼。