[發明專利]一種海藻酸鈣多相微載體的制備方法

在審

• 申請號: 201710294315.5
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN108795921A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 劉柯蕊;林輝;馮章啟
• 申請（專利權）人: 南京理工大學
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;A61L27/52;A61L27/20;A61L27/02;A61K9/06;A61K47/36;A61K47/02
• 代理公司: 南京理工大學專利中心 32203
• 代理人: 劉海霞

本發明公開了一種海藻酸鈣多相微載體的制備方法。所述方法采用靜電噴射技術，將海藻酸鈉水溶液在靜電作用下雙針頭并噴形成均勻液滴，液滴進入到氯化鈣溶液中，制得兩相凝膠微球。本發明的制備方法簡單，制備的微球粒徑在150?250μm，可控性較強。海藻酸鈉具有良好的生物安全性、生物相容性、生物降解性與可加工性。本發明方法制得的海藻酸鈣多相微載體，微球兩相區域能夠促進細胞的功能表達，可同時擔載多種細胞和多種生長因子，考察細胞的生物活性，進一步開發具有磁性、熱學等性能的功能性微載體。

技術領域

本發明屬于靜電噴射技術領域，涉及一種海藻酸鈣多相微載體的制備方法。

背景技術

細胞培養技術作為研究細胞結構和功能的基礎與批量化生產商品型細胞及其產物的重要方法，作用十分關鍵。微載體培養兼具貼壁培養和懸浮培養的優勢，具有很高的比表面積，擴散路徑短，易于操作和監控等特點。國內目前常見的微載體類型有實心微載體和多孔微載體。已有的單相微載體培養極大地限制了不同細胞或生物因子等相互作用下的功能表達(周燕等.微載體培養技術的研究與進展[J].中國組織工程研究與臨床康復,2010,(16):2945-2948.)。將微載體培養的細胞注入生物體內時，由于體內成型困難和微球游走，其定位性與固定性不強。同時由于生物體內免疫系統的排斥，使其細胞的功能表達明顯減少。另外，在選擇制造微載體的生物材料時，必須考慮其是否具有良好的生物安全性、生物相容性、生物降解性與可加工性。

海藻酸鈉，一種天然多糖，具有藥物制劑輔料所需的穩定性、溶解性、粘性和安全性。目前海藻酸鈉主要用于食品工業、制藥業等，而未用于細胞培養方面，特別是多相細胞微載體的構建。

發明內容

本發明的目的是提供一種海藻酸鈣多相微載體的制備方法。該方法采用電噴技術，將海藻酸鈉水溶液在靜電作用下雙針頭并噴形成均勻液滴，調控承接液氯化鈣溶液的濃度，海藻酸鈉液滴經螯合作用形成球狀微球。本發明方法制得的微載體由兩相組成，可同時擔載多種細胞和多種生長因子，為細胞的共培養創造良好的條件，為組織工程、細胞治療等奠定良好的基礎。

實現本發明目的的技術解決方案是：

一種海藻酸鈣多相微載體的制備方法，包括以下步驟：

采用雙針頭并噴的方式，設置電壓為8～12kv，接收距離為10～15cm，推進速度為0.8～1.0mL/h，將質量分數為0.2～0.75％的海藻酸鈉溶液進行靜電噴射，噴出的液滴進入到質量分數為1.0～2.0％的氯化鈣溶液中，制得海藻酸鈣多相微載體。

優選地，所述的海藻酸鈉溶液的質量分數為0.5％。

優選地，所述的氯化鈣溶液的質量分數為1.5％。

優選地，針頭直徑為0.60mm。

本發明利用海藻酸鈉具有形成凝膠的穩定性，采用雙針頭靜電噴射的方法，再加以利用適宜濃度的承接液氯化鈣溶液的螯合作用，形成球形水凝膠。本發明方法簡單，成本低廉，反應條件溫和，能夠有效調控水凝膠形狀、大小及其分相區。本發明的海藻酸鈣微載體具有多相區域，有利于不同細胞或生物因子等相互作用下的功能表達。

附圖說明

圖1為海藻酸鈣兩相微球的示意圖。

圖2為海藻酸鈣兩相微球的光學顯微鏡圖。

具體實施方式

下面結合實施例和附圖對本發明作進一步詳述。

實施例1

以氯化鈣及濃度為0.2％的海藻酸鈉為原料制備多相微載體：

(1)配制質量分數為0.2％的海藻酸鈉溶液，并在磁力攪拌下至溶液澄清均一，然后靜置一夜；