[發(fā)明專利]一種防治矮牽牛病毒病的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710292176.2
• 申請(qǐng)日: 2017-04-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108782232A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 常鑫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 常鑫
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明涉及一種弱病毒防治矮牽牛病毒病的方法，按如下步驟進(jìn)行：1)培養(yǎng)基的配制；2)矮牽牛莖尖脫毒培養(yǎng)；3)病毒ELISA檢測(cè)：4)弱病毒的接種；5)弱病毒植株的組培繁殖。本發(fā)明的有益效果是：利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行接種弱病毒植株的組培繁殖，繁殖的組培苗：100％攜帶弱病毒，并可連續(xù)地繁殖下去，作為生產(chǎn)用種，省去以往每年生產(chǎn)前都需進(jìn)行免疫接種，成倍地提高了工作效率。弱病毒保護(hù)的矮牽牛其花葉病毒和類似病癥的發(fā)病率低于3％，植株健壯、花大色艷，品質(zhì)明顯提高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物病毒的防治技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種弱病毒防治矮牽牛病毒病的方法。

背景技術(shù)

矮牽牛原產(chǎn)南美，屬茄科碧冬茄屬植物，是一種廣泛用于盆栽、花壇的草本植物。因其花期長(zhǎng)，花色品種多而深受人們的喜愛(ài)，在美化環(huán)境上有很高的觀賞價(jià)值。但因病毒的嚴(yán)重危害，癥狀感病植株出現(xiàn)葉斑駁癥，形成花葉，顏色有深有淺，常伴有葉卷曲，生長(zhǎng)勢(shì)減弱，花畸形，變小等，使其觀賞價(jià)值大大降低。據(jù)調(diào)查表明，種子繁殖的發(fā)病率為20～30％，無(wú)性繁殖的發(fā)病率可高達(dá)902,乞左右。自然侵染矮牽牛的病毒以黃瓜花葉病毒(CMV)為主。

植物病毒是侵染蔬菜花卉藥材和大田作物的細(xì)胞內(nèi)致病的微生物，因?yàn)槠浒凑占闹鞯募?xì)胞系統(tǒng)進(jìn)行基本的代謝和復(fù)制侵染過(guò)程，因些其不能像細(xì)菌和真菌等病原微生物那樣通過(guò)藥物治療達(dá)到根除效果。迄今，對(duì)植物病毒進(jìn)行控制仍然沒(méi)有“特效藥”，控制的主要方法是預(yù)防其侵染。實(shí)踐證明：預(yù)先接種弱病毒株能夠干擾其后侵梁的強(qiáng)病毒株的危害，降低其影響，達(dá)到抗病增產(chǎn)和改善作物品質(zhì)的作用。以黃瓜花葉病毒(CMV)為例，該病毒能夠侵染1000多種植物，可經(jīng)75種蚜蟲傳播，也是目前世界范圍內(nèi)寄主植物最多、分布最廣、危害嚴(yán)重的植物病毒之一。預(yù)防病毒傳播媒介昆蟲和獲得無(wú)病毒繁殖材料并不是在任何情況下均能夠有效實(shí)施。用弱病毒株進(jìn)行預(yù)防接種的方法是行之有效的方法之一。但是，預(yù)防接種的方法大都采用浸根、噴槍和摩擦接種法，在接種弱病毒前必須進(jìn)行種子消毒和苗床防治蚜蟲、白粉虱，嚴(yán)防幼苗在接種弱病毒前被強(qiáng)病毒感染，具有費(fèi)時(shí)、使用方法繁瑣、效率低等缺點(diǎn)，故不利于產(chǎn)業(yè)化，無(wú)法滿足現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種弱病毒防治矮牽牛病毒病的方法。

本發(fā)明的目的是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

1、一種防治矮牽牛病毒病的方法，其特征在于：該方法按以下步驟進(jìn)行：

1)、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為：

(1)基本培養(yǎng)基；

(2)誘導(dǎo)培養(yǎng)基；

(3)增殖培養(yǎng)基；

(4)生根培養(yǎng)基；

2)、矮牽牛莖尖脫毒培養(yǎng)：

(1)外植體的選取與滅菌；

(2)莖尖脫毒培養(yǎng)；

(3)增殖培養(yǎng)；

(4)壯苗培養(yǎng)；

(5)生根培養(yǎng)；

(6)移栽；

(7)定植；

3)、病毒ELISA檢測(cè)：

將常規(guī)溫室中發(fā)生的矮牽牛病毒，經(jīng)擴(kuò)增、克隆和原核表達(dá)所獲得的相關(guān)病毒外殼蛋白，注射小鼠或家兔免疫并制備成病毒特異性抗缸清后，對(duì)移栽苗和開(kāi)花植株進(jìn)行病毒ELIsA檢測(cè)；

4)、弱病毒的接種

將黃瓜花葉病毒的弱病毒株通過(guò)常規(guī)汁液摩擦方法接種到步驟3)檢測(cè)為無(wú)病毒的矮牽牛植株上：

5)、弱病毒植株的組培繁殖：