[發明專利]一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法

有效

• 申請號: 201710291106.5
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN107653273B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 張媛媛;魯佩玉;李濤;孫青華;王繁業
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 李宏偉

1.一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法，具體步驟如下：向反應器中加入水互溶有機溶劑單相體系作為反應介質，所述水互溶有機溶劑單相體系為pH7.0磷酸鹽緩沖液與5％v/v有機溶劑混合后形成的均相體系，并向其中加入2,3-二甲基氫醌和胺供體，所述胺供體為正丙胺、正己胺、異丙胺或異辛胺，使2,3-二甲基氫醌濃度為1.0-3.0mol/L，胺供體與2,3-二甲基氫醌摩爾比為1:1，加入雙酶交聯酶聚集體為催化劑進行反應制得產品，所述雙酶交聯酶聚集體為嗜熱毀絲霉漆酶/黑曲酶脂肪酶雙酶交聯酶聚集體，其中雙酶交聯酶聚集體的使用量為30-50g/mol氫醌。

2.根據權利要求1所述的一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法，其特征在于：所述有機溶劑為甲醇、異丙醇或二甲亞砜。

3.根據權利要求1所述的一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法，其特征在于：所述反應于室溫下，180rpm，通氣量1.0-5.0vvm條件下進行2-5h。

4.根據權利要求1所述的一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法，其特征在于：還包括后處理步驟，所述后處理為反應結束后濾出雙酶交聯酶聚集體，濾液經真空減壓濃縮，用乙酸乙酯萃取產物；所述萃取物用10％NaHCO₃溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，真空減壓濃縮得粗產物，粗產物進一步用乙醇重結晶，得到紅色晶體即為產物。

5.根據權利要求1-4任一項所述的一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法，其特征在于：所述的嗜熱毀絲霉漆酶/黑曲酶脂肪酶雙酶交聯酶聚集體的制備方法如下：將嗜熱毀絲霉漆酶酶粉≥800U/g和黑曲酶脂肪酶酶粉≥800U/g混合物，用pH7.0緩沖液溶解，于4℃條件下150rpm慢速攪拌下加入硫酸銨,使其濃度為0.3-0.5kg/L,繼續攪拌30min,再向此溶液中加入交聯劑戊二醛，使其濃度為0.1-0.3％，交聯1-2h，混合溶液于4℃,5000×g離心10min，去掉上清液，沉淀用去離子水洗滌，冷凍干燥，即 得嗜熱毀絲霉漆酶/黑曲酶脂肪酶雙酶交聯酶聚集體。

6.根據權利要求5所述的一種雙酶一鍋法合成2,3-二甲基-5烷氨基-1,4-苯醌的方法，其特征在于，所述的嗜熱毀絲霉漆酶/黑曲酶脂肪酶雙酶交聯酶聚集體的制備所加入的嗜熱毀絲霉漆酶酶粉和黑曲酶脂肪酶酶粉的酶活力之比為1:10-1:5。