[發明專利]一種耐卡鉑卵巢癌細胞系及其應用

有效

• 申請號: 201710290708.9
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN107090435B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 許國雄;張勁國;張凌云
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬金山醫院
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12Q1/02;C12R1/91
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 巫蓓麗

本發明涉及一種耐卡鉑卵巢癌細胞系及其應用。本發明通過細致觀測細胞生長形態來決定藥物誘導的干預時機，建立了一株耐卡鉑卵巢癌細胞系，保藏號為CCTCC NO∶C201736，其耐藥性顯著高于同期建立的其他細胞系，并且表現出極穩定的耐藥性，可作為探索卵巢癌耐藥發生發展機制的可靠生物學模型，尋找卵巢癌耐藥后的治療方法。

技術領域

本發明涉及耐藥細胞系的建立，具體地說，涉及一種耐卡鉑(carboplatin，CBP)卵巢癌細胞系及其應用。

背景技術

卵巢癌是致女性死亡的首位生殖道惡性腫瘤，臨床上，其主要治療方式是在腫瘤細胞減滅術的基礎上鉑類聯合紫杉醇的化療方案，化療初始治療效果好，但易發生耐藥，耐藥后治療效果差。普通卵巢癌細胞株在研究卵巢癌耐藥機制中存在局限性，而卡鉑耐藥細胞株將更能模擬臨床卵巢癌耐藥的發生。

中國專利文獻ZL201410708515.7，授權公告日：2017年1月25日，公開了一種耐紫杉醇卵巢癌細胞模型，具體建立方法為：分別用PTX干預OVCAR-3細胞和SK-OV-3細胞，然后換無PTX培養基，至細胞生長恢復正常即細胞穩定生長、形態飽滿、無漂浮死細胞、傳代密度為30％的情況下3至5天可長至90％后再開始正常傳代并提高PTX的濃度，每次干預時間為24小時，最終獲得保藏號為CCTCC C2014203和CCTCC C2014204的耐紫杉醇卵巢癌細胞模型。

中國期刊文獻《中華臨床醫師雜志》，2016年5月第10卷第10期刊出的論文“卡鉑誘導卵巢癌耐藥特性的體外研究”，模仿臨床卵巢癌化療模型，采用中等劑量、間歇作用法，建立了卵巢癌SKOV3細胞對卡鉑耐藥的細胞系SKOV3/CBP，并進一步研究了其耐藥特性及耐藥后吲哚胺2,3雙加氧酶(IDO)的表達，初步探討了耐藥與IDO的關系，進一步明確了耐藥卵巢癌轉移或復發的機制。

然而目前未見耐卡鉑的OVCAR-3細胞系。而新的耐藥細胞系將有助于進一步探討耐藥機制或佐證已有的研究結果，尤其是耐藥指數高、耐藥穩定性好的細胞系，將為耐藥機制的研究提供很大的便利，也為實驗結果的準確性奠定基礎。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種耐卡鉑卵巢癌細胞系。

本發明的再一的目的是，提供所述的耐卡鉑卵巢癌細胞系的用途。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：

一種耐卡鉑卵巢癌細胞系，所述的耐卡鉑卵巢癌細胞系保藏號為CCTCC NO∶C201736。

為實現上述第二個目的，本發明采取的技術方案是：

所述的耐卡鉑卵巢癌細胞系在研究卵巢癌耐藥發生發展機制、尋找卵巢癌耐藥逆轉的靶點或篩選卵巢癌藥物中的應用。

本發明優點在于：

本發明通過細致觀測細胞生長形態來決定藥物誘導的干預時機，建立了一株耐卡鉑卵巢癌細胞系，保藏號為CCTCC NO∶C201736，其耐藥性顯著高于同期建立的其他細胞系，并且表現出極穩定的耐藥性，可作為探索卵巢癌耐藥發生發展機制的可靠生物學模型，尋找卵巢癌耐藥后的治療方法，如耐藥逆轉或藥物增敏等。

具體實施方式

實施例1

一、材料

OVCAR-3細胞購自美國ATCC公司。

卡鉑(CBP)注射液購自齊魯制藥有限公司：50mg/10ml/支。

卡鉑工作液用細胞培養基(RPMI-1640+10％FBS，購自美國Gibco公司)配制。

二、建株步驟